南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
7期
1026-1030
,共5页
姜容%龙北国%曾桂芬%王丹%范宏英%吴娴波
薑容%龍北國%曾桂芬%王丹%範宏英%吳嫻波
강용%룡북국%증계분%왕단%범굉영%오한파
肠出血性大肠埃希菌O157:H7%环介导等温扩增技术%PCR技术%rfbE基因
腸齣血性大腸埃希菌O157:H7%環介導等溫擴增技術%PCR技術%rfbE基因
장출혈성대장애희균O157:H7%배개도등온확증기술%PCR기술%rfbE기인
目的 建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC) O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较.方法 针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR榆测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果.结果 成功建立了LAMP和PCR榆测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfi/ml,PCR检测限为102 cfu/ml,LAMP检测灵敏度高于PCR;对39株近源菌进行检测,结果显示,LAMP法仅7株EHEC O157:H7得到阳性结果,非EHEC O157:H7菌株均为阴性,PCR产物则出现非特异性条带,LAMP法特异性比PCR法高.对于32份猪肉样品的检测,LAMP和PCR与常规检测结果一致,3份样品检测阳性.结论 LAMP检测技术的特异性和灵敏度较PCR高,并且操作简便、检测成本低,耗时短,更有望发展成为快速准确检测EHEC O157:H7的有效手段.
目的 建立基于環介導等溫擴增(LAMP)技術的腸齣血性大腸埃希菌(EHEC) O157:H7快速簡便檢測方法,併與PCR進行比較.方法 針對EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,設計特異性引物,建立LAMP和PCR榆測技術併優化其反應條件,比較這兩種檢測方法的靈敏度、特異性和對實際樣品的檢測結果.結果 成功建立瞭LAMP和PCR榆測體繫,靈敏度檢測結果顯示,LAMP檢測限低至10 cfi/ml,PCR檢測限為102 cfu/ml,LAMP檢測靈敏度高于PCR;對39株近源菌進行檢測,結果顯示,LAMP法僅7株EHEC O157:H7得到暘性結果,非EHEC O157:H7菌株均為陰性,PCR產物則齣現非特異性條帶,LAMP法特異性比PCR法高.對于32份豬肉樣品的檢測,LAMP和PCR與常規檢測結果一緻,3份樣品檢測暘性.結論 LAMP檢測技術的特異性和靈敏度較PCR高,併且操作簡便、檢測成本低,耗時短,更有望髮展成為快速準確檢測EHEC O157:H7的有效手段.
목적 건립기우배개도등온확증(LAMP)기술적장출혈성대장애희균(EHEC) O157:H7쾌속간편검측방법,병여PCR진행비교.방법 침대EHEC O157:H7보수적rfbE기인서렬,설계특이성인물,건립LAMP화PCR유측기술병우화기반응조건,비교저량충검측방법적령민도、특이성화대실제양품적검측결과.결과 성공건립료LAMP화PCR유측체계,령민도검측결과현시,LAMP검측한저지10 cfi/ml,PCR검측한위102 cfu/ml,LAMP검측령민도고우PCR;대39주근원균진행검측,결과현시,LAMP법부7주EHEC O157:H7득도양성결과,비EHEC O157:H7균주균위음성,PCR산물칙출현비특이성조대,LAMP법특이성비PCR법고.대우32빈저육양품적검측,LAMP화PCR여상규검측결과일치,3빈양품검측양성.결론 LAMP검측기술적특이성화령민도교PCR고,병차조작간편、검측성본저,모시단,경유망발전성위쾌속준학검측EHEC O157:H7적유효수단.
