中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2003年
11期
844-848
,共5页
林旭%徐晓%郑大利%林万松%林建银
林旭%徐曉%鄭大利%林萬鬆%林建銀
림욱%서효%정대리%림만송%림건은
乙型肝炎病毒%RNA剪接%聚合酶链反应%转染
乙型肝炎病毒%RNA剪接%聚閤酶鏈反應%轉染
을형간염병독%RNA전접%취합매련반응%전염
目的证实乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)前基因组RNA在458nt~1308nt(nt,核苷酸)之间可发生剪接并产生相应的基因组剪接变异体. 方法对1株分离自慢性乙型肝炎患者血清的亚基因组HBV DNA(2366bp)进行测序并以Vector NTI6.0软件进行分析.将全基因组HBV DNA(3215bp)理论上可能的剪接供体及受体内的核苷酸进行定点突变并将突变株转染HepG2细胞,以位于HBV DNA 458nt及1308nt两侧的特异引物检测转染后的细胞内HBV核心颗粒DNA,并以相同引物检测458nt~1308nt发生缺失的HBV DNA在不同病程的乙型肝炎患者血清中的存在情况. 结果2366bp HBV DNA在458nt~1308nt之间发生缺失并符合GT-AG剪接模式.3215bp全基因组HBV DNA在459nt及1306nt分别发生G→A及A→C突变后均不能产生458nt~1308nt缺失.458nt~1308nt发生缺失的HBV DNA在慢性乙型肝炎、肝硬化及原发性肝细胞癌患者血清的检出率分别为80%、75%及70%,显著高于HBV无症状携带者10%的检出率. 结论 HBV前基因组RNA在458nt~1308nt之间可发生剪接并产生长度为2366bp的基因组剪接变异体.该类型基因组剪接变异体基因结构特点及在HBV相关性肝病中广泛存在提示它与HBV致病性密切相关.
目的證實乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)前基因組RNA在458nt~1308nt(nt,覈苷痠)之間可髮生剪接併產生相應的基因組剪接變異體. 方法對1株分離自慢性乙型肝炎患者血清的亞基因組HBV DNA(2366bp)進行測序併以Vector NTI6.0軟件進行分析.將全基因組HBV DNA(3215bp)理論上可能的剪接供體及受體內的覈苷痠進行定點突變併將突變株轉染HepG2細胞,以位于HBV DNA 458nt及1308nt兩側的特異引物檢測轉染後的細胞內HBV覈心顆粒DNA,併以相同引物檢測458nt~1308nt髮生缺失的HBV DNA在不同病程的乙型肝炎患者血清中的存在情況. 結果2366bp HBV DNA在458nt~1308nt之間髮生缺失併符閤GT-AG剪接模式.3215bp全基因組HBV DNA在459nt及1306nt分彆髮生G→A及A→C突變後均不能產生458nt~1308nt缺失.458nt~1308nt髮生缺失的HBV DNA在慢性乙型肝炎、肝硬化及原髮性肝細胞癌患者血清的檢齣率分彆為80%、75%及70%,顯著高于HBV無癥狀攜帶者10%的檢齣率. 結論 HBV前基因組RNA在458nt~1308nt之間可髮生剪接併產生長度為2366bp的基因組剪接變異體.該類型基因組剪接變異體基因結構特點及在HBV相關性肝病中廣汎存在提示它與HBV緻病性密切相關.
목적증실을형간염병독(hepatitis B virus, HBV)전기인조RNA재458nt~1308nt(nt,핵감산)지간가발생전접병산생상응적기인조전접변이체. 방법대1주분리자만성을형간염환자혈청적아기인조HBV DNA(2366bp)진행측서병이Vector NTI6.0연건진행분석.장전기인조HBV DNA(3215bp)이론상가능적전접공체급수체내적핵감산진행정점돌변병장돌변주전염HepG2세포,이위우HBV DNA 458nt급1308nt량측적특이인물검측전염후적세포내HBV핵심과립DNA,병이상동인물검측458nt~1308nt발생결실적HBV DNA재불동병정적을형간염환자혈청중적존재정황. 결과2366bp HBV DNA재458nt~1308nt지간발생결실병부합GT-AG전접모식.3215bp전기인조HBV DNA재459nt급1306nt분별발생G→A급A→C돌변후균불능산생458nt~1308nt결실.458nt~1308nt발생결실적HBV DNA재만성을형간염、간경화급원발성간세포암환자혈청적검출솔분별위80%、75%급70%,현저고우HBV무증상휴대자10%적검출솔. 결론 HBV전기인조RNA재458nt~1308nt지간가발생전접병산생장도위2366bp적기인조전접변이체.해류형기인조전접변이체기인결구특점급재HBV상관성간병중엄범존재제시타여HBV치병성밀절상관.