CAJ | 학술논문

目的构建血管基膜衍生多功能肽(VBMDMP)原核表达载体、诱导表达GST-VBMDMP融合蛋白,观察其对Lewis肺癌自发转移瘤模型的影响.方法人工合成VBMDMP DNA序列(人源性IgG3上游铰链区连接肽连接的Tumstatin的两个功能区获得性肽基因序列),构建克隆载体PUC19-VBMDMP,亚克隆到Pgex-4T-1原核表达载体上,经测序和酶切分析鉴定获得了未发生移码突变的PGEX-4T-1-VBMDMP融合载体质粒.转化入大肠杆菌后,用IPTG诱导表达融合蛋白.Glutathione sepharose 4B层析柱纯化蛋白表达产物.采用Lewis肺癌自发转移瘤模型,检测VBMDMP的抗肿瘤作用.结果成功的构建pUC19-VBMDMP克隆和pGEX-4T-1-VBMDMP表达载体,在大肠杆菌获得稳定表达,用Glutathione sepharose 4B层析柱获得纯化的GST-VBMDMP融合蛋白.VBMDMP(GST-VBMDMP 10、6、2 mg*kg-1)对小鼠Lewis肺癌原发瘤具有抑制作用(瘤重抑制率分别为95.5%, 80.4%, 60.05%).VBMDMP(GST-VBMDMP10,6,2 mg*kg-1)对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移具有抑制作用(自发性肺转移瘤结节抑制率分别为94.8%,86.4%,73.9%).结论VBMDMP对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有抑制作用.
목적구건혈관기막연생다공능태(VBMDMP)원핵표체재체、유도표체GST-VBMDMP융합단백,관찰기대Lewis폐암자발전이류모형적영향.방법인공합성VBMDMP DNA서렬(인원성IgG3상유교련구련접태련접적Tumstatin적량개공능구획득성태기인서렬),구건극륭재체PUC19-VBMDMP,아극륭도Pgex-4T-1원핵표체재체상,경측서화매절분석감정획득료미발생이마돌변적PGEX-4T-1-VBMDMP융합재체질립.전화입대장간균후,용IPTG유도표체융합단백.Glutathione sepharose 4B층석주순화단백표체산물.채용Lewis폐암자발전이류모형,검측VBMDMP적항종류작용.결과성공적구건pUC19-VBMDMP극륭화pGEX-4T-1-VBMDMP표체재체,재대장간균획득은정표체,용Glutathione sepharose 4B층석주획득순화적GST-VBMDMP융합단백.VBMDMP(GST-VBMDMP 10、6、2 mg*kg-1)대소서Lewis폐암원발류구유억제작용(류중억제솔분별위95.5%, 80.4%, 60.05%).VBMDMP(GST-VBMDMP10,6,2 mg*kg-1)대소서Lewis폐암자발성폐전이구유억제작용(자발성폐전이류결절억제솔분별위94.8%,86.4%,73.9%).결론VBMDMP대소서Lewis폐암원발류화폐전이구유억제작용.