吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2007年
3期
454-459
,共6页
李光源%贺冰%冯非%孟祥俊%宋忆淑%王晓祺
李光源%賀冰%馮非%孟祥俊%宋憶淑%王曉祺
리광원%하빙%풍비%맹상준%송억숙%왕효기
疱疹病毒1型,人%疫苗,DNA%糖蛋白B截短基因%流式细胞术%羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯
皰疹病毒1型,人%疫苗,DNA%糖蛋白B截短基因%流式細胞術%羧基熒光素二醋痠鹽琥珀酰亞胺酯
포진병독1형,인%역묘,DNA%당단백B절단기인%류식세포술%최기형광소이작산염호박선아알지
目的:构建、制备单纯疱疹病毒1型截短糖蛋白B DNA疫苗,检测其诱导机体产生的细胞免疫应答效果.方法:利用PCR技术从HSV-1 SM44毒株基因组中扩增出编码HSV-1 gB14～507氨基酸序列的一段基因.定向插入真核表达质粒pcDNA3载体中,构建出重组真核表达质粒pcDNA3-gBt,并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定.于BALB/c鼠注射免疫3次,抗体分析CD4+、CD8+T细胞亚群的变化,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)/碘化丙碇(PI)双标记的流式细胞计数法检测CTL活性.结果:PCR及测序鉴定结果显示,插入的克隆基因与GenBank中HSV-1F株gB基因序列一致,证实了HSV-1 gBt核酸疫苗的构建;pcDNA3-gBt免疫组BALB/c鼠的CD4+T细胞数较空质粒(pcDNA3)对照组和生理盐水对照组增加,CTL活性也较对照组明显增强,但是pcDNA3-gBt免疫组BALB/c鼠的CD8+T细胞、CD4+/CD8+T细胞比值与对照组比较差异均无显著性(P＞0.05).结论:HSV-1 gBt核酸疫苗诱导较强的细胞免疫应答.
目的:構建、製備單純皰疹病毒1型截短糖蛋白B DNA疫苗,檢測其誘導機體產生的細胞免疫應答效果.方法:利用PCR技術從HSV-1 SM44毒株基因組中擴增齣編碼HSV-1 gB14～507氨基痠序列的一段基因.定嚮插入真覈錶達質粒pcDNA3載體中,構建齣重組真覈錶達質粒pcDNA3-gBt,併對其進行酶切分析、PCR鑒定及測序鑒定.于BALB/c鼠註射免疫3次,抗體分析CD4+、CD8+T細胞亞群的變化,羧基熒光素二醋痠鹽琥珀酰亞胺酯(CFSE)/碘化丙碇(PI)雙標記的流式細胞計數法檢測CTL活性.結果:PCR及測序鑒定結果顯示,插入的剋隆基因與GenBank中HSV-1F株gB基因序列一緻,證實瞭HSV-1 gBt覈痠疫苗的構建;pcDNA3-gBt免疫組BALB/c鼠的CD4+T細胞數較空質粒(pcDNA3)對照組和生理鹽水對照組增加,CTL活性也較對照組明顯增彊,但是pcDNA3-gBt免疫組BALB/c鼠的CD8+T細胞、CD4+/CD8+T細胞比值與對照組比較差異均無顯著性(P＞0.05).結論:HSV-1 gBt覈痠疫苗誘導較彊的細胞免疫應答.
목적:구건、제비단순포진병독1형절단당단백B DNA역묘,검측기유도궤체산생적세포면역응답효과.방법:이용PCR기술종HSV-1 SM44독주기인조중확증출편마HSV-1 gB14～507안기산서렬적일단기인.정향삽입진핵표체질립pcDNA3재체중,구건출중조진핵표체질립pcDNA3-gBt,병대기진행매절분석、PCR감정급측서감정.우BALB/c서주사면역3차,항체분석CD4+、CD8+T세포아군적변화,최기형광소이작산염호박선아알지(CFSE)/전화병정(PI)쌍표기적류식세포계수법검측CTL활성.결과:PCR급측서감정결과현시,삽입적극륭기인여GenBank중HSV-1F주gB기인서렬일치,증실료HSV-1 gBt핵산역묘적구건;pcDNA3-gBt면역조BALB/c서적CD4+T세포수교공질립(pcDNA3)대조조화생리염수대조조증가,CTL활성야교대조조명현증강,단시pcDNA3-gBt면역조BALB/c서적CD8+T세포、CD4+/CD8+T세포비치여대조조비교차이균무현저성(P＞0.05).결론:HSV-1 gBt핵산역묘유도교강적세포면역응답.
