医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2010年
8期
795-799
,共5页
周济宏%李幼生%洪志坚%胡心宝%解伟光%于泽平
週濟宏%李幼生%洪誌堅%鬍心寶%解偉光%于澤平
주제굉%리유생%홍지견%호심보%해위광%우택평
肿瘤坏死因子-α%[3H]-L-谷氨酰胺%肠黏膜上皮细胞株%谷氨酰胺载体%ASCT2
腫瘤壞死因子-α%[3H]-L-穀氨酰胺%腸黏膜上皮細胞株%穀氨酰胺載體%ASCT2
종류배사인자-α%[3H]-L-곡안선알%장점막상피세포주%곡안선알재체%ASCT2
目的 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是感染中最重要的调节因子,谷氨酰胺需经过其载体转运至细胞内才能被利用.文中研究TNF-α对肠黏膜上皮细胞株(intestinal epithelial cell line,IEC)-6细胞膜谷氨酰胺载体功能、ASCT2 mRNA及蛋白表达的可能影响,揭示TNF-α对细胞膜谷氨酰胺载体功能的影响机制.方法 体外培养IEC-6,分为对照组(不与TNF-α共孵育)和实验组(与TNF-α共孵育):实验组与不同剂量的TNF-α(2、5、8、10 ng/ml)共孵育2 h后,测定细胞[3H]-L-谷氨酰胺摄取率;实验组与5 ng/ml TNF-α共孵育不同时段(2、5、8、10 h)后,测定ASCT2载体mRNA水平;实验组与5 ng/ml TNF-α共孵育不同时段(2、6 h)后,检测载体ASCT2蛋白表达水平.结果 不同TNF-α剂量孵育的实验组[3H]-L-谷氨酰胺摄取率显著低于对照组(P<0.01),实验组之间差异无显著性意义(P>0.05);孵育2 h的实验组ASCT2载体mRNA水平显著高于对照组(P<0.01),时间延长后逐渐下降,10 h则与对照组差异无显著性意义(P>0.05);不同时段实验组载体ASCT2蛋白表达水平均显著低于对照组(P<0.01),实验组间差异无显著性意义(P>0.05).结论 TNF-α抑制IEC-6细胞膜谷氨酰胺载体的摄取功能,抑制ASCT2蛋白表达,但不抑制IEC-6细胞ASCT2载体mRNA的表达.TNF-α对细胞膜谷氨酰胺载体功能的抑制可能发生在载体蛋白的翻译或以后水平.
目的 腫瘤壞死因子-α(TNF-α)是感染中最重要的調節因子,穀氨酰胺需經過其載體轉運至細胞內纔能被利用.文中研究TNF-α對腸黏膜上皮細胞株(intestinal epithelial cell line,IEC)-6細胞膜穀氨酰胺載體功能、ASCT2 mRNA及蛋白錶達的可能影響,揭示TNF-α對細胞膜穀氨酰胺載體功能的影響機製.方法 體外培養IEC-6,分為對照組(不與TNF-α共孵育)和實驗組(與TNF-α共孵育):實驗組與不同劑量的TNF-α(2、5、8、10 ng/ml)共孵育2 h後,測定細胞[3H]-L-穀氨酰胺攝取率;實驗組與5 ng/ml TNF-α共孵育不同時段(2、5、8、10 h)後,測定ASCT2載體mRNA水平;實驗組與5 ng/ml TNF-α共孵育不同時段(2、6 h)後,檢測載體ASCT2蛋白錶達水平.結果 不同TNF-α劑量孵育的實驗組[3H]-L-穀氨酰胺攝取率顯著低于對照組(P<0.01),實驗組之間差異無顯著性意義(P>0.05);孵育2 h的實驗組ASCT2載體mRNA水平顯著高于對照組(P<0.01),時間延長後逐漸下降,10 h則與對照組差異無顯著性意義(P>0.05);不同時段實驗組載體ASCT2蛋白錶達水平均顯著低于對照組(P<0.01),實驗組間差異無顯著性意義(P>0.05).結論 TNF-α抑製IEC-6細胞膜穀氨酰胺載體的攝取功能,抑製ASCT2蛋白錶達,但不抑製IEC-6細胞ASCT2載體mRNA的錶達.TNF-α對細胞膜穀氨酰胺載體功能的抑製可能髮生在載體蛋白的翻譯或以後水平.
목적 종류배사인자-α(TNF-α)시감염중최중요적조절인자,곡안선알수경과기재체전운지세포내재능피이용.문중연구TNF-α대장점막상피세포주(intestinal epithelial cell line,IEC)-6세포막곡안선알재체공능、ASCT2 mRNA급단백표체적가능영향,게시TNF-α대세포막곡안선알재체공능적영향궤제.방법 체외배양IEC-6,분위대조조(불여TNF-α공부육)화실험조(여TNF-α공부육):실험조여불동제량적TNF-α(2、5、8、10 ng/ml)공부육2 h후,측정세포[3H]-L-곡안선알섭취솔;실험조여5 ng/ml TNF-α공부육불동시단(2、5、8、10 h)후,측정ASCT2재체mRNA수평;실험조여5 ng/ml TNF-α공부육불동시단(2、6 h)후,검측재체ASCT2단백표체수평.결과 불동TNF-α제량부육적실험조[3H]-L-곡안선알섭취솔현저저우대조조(P<0.01),실험조지간차이무현저성의의(P>0.05);부육2 h적실험조ASCT2재체mRNA수평현저고우대조조(P<0.01),시간연장후축점하강,10 h칙여대조조차이무현저성의의(P>0.05);불동시단실험조재체ASCT2단백표체수평균현저저우대조조(P<0.01),실험조간차이무현저성의의(P>0.05).결론 TNF-α억제IEC-6세포막곡안선알재체적섭취공능,억제ASCT2단백표체,단불억제IEC-6세포ASCT2재체mRNA적표체.TNF-α대세포막곡안선알재체공능적억제가능발생재재체단백적번역혹이후수평.
