华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
5期
646-651
,共6页
何超军%邱杨玉%毛芝娟%陈吉刚%吴志新
何超軍%邱楊玉%毛芝娟%陳吉剛%吳誌新
하초군%구양옥%모지연%진길강%오지신
哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)%外膜蛋白OmpK%表达载体%毕赤酵母%表达
哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)%外膜蛋白OmpK%錶達載體%畢赤酵母%錶達
합유씨호균(Vibrio harveyi)%외막단백OmpK%표체재체%필적효모%표체
摘要采用已构建的原核重组质粒pET30a-Om pK为模板,通过PCR扩增Om pK成熟肽基因片段,引入酶切位点后克隆至分泌表达载体pPIC9K,经Sal I线性化后,氯化锂法转化至毕赤酵母GS115中,并经G418遗传霉素筛选高拷贝酵母转化子,最后进行甲醇诱导表达,表达上清经SDS-PAGE电泳检测及Western-blot鉴定,表明重组蛋白已经表达.
摘要採用已構建的原覈重組質粒pET30a-Om pK為模闆,通過PCR擴增Om pK成熟肽基因片段,引入酶切位點後剋隆至分泌錶達載體pPIC9K,經Sal I線性化後,氯化鋰法轉化至畢赤酵母GS115中,併經G418遺傳黴素篩選高拷貝酵母轉化子,最後進行甲醇誘導錶達,錶達上清經SDS-PAGE電泳檢測及Western-blot鑒定,錶明重組蛋白已經錶達.
적요채용이구건적원핵중조질립pET30a-Om pK위모판,통과PCR확증Om pK성숙태기인편단,인입매절위점후극륭지분비표체재체pPIC9K,경Sal I선성화후,록화리법전화지필적효모GS115중,병경G418유전매소사선고고패효모전화자,최후진행갑순유도표체,표체상청경SDS-PAGE전영검측급Western-blot감정,표명중조단백이경표체.
