江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2012年
2期
93-96
,共4页
李婷芬%王冰莹%严永敏%李里明%蒋留留%钱晖
李婷芬%王冰瑩%嚴永敏%李裏明%蔣留留%錢暉
리정분%왕빙형%엄영민%리리명%장류류%전휘
人肝细胞株%转化生长因子β1%上皮间质转化
人肝細胞株%轉化生長因子β1%上皮間質轉化
인간세포주%전화생장인자β1%상피간질전화
目的:探讨体外培养的人肝细胞系在重组人转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下是否发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchyme transition,EMT)以及相关标志物的表达变化.方法:人类肝细胞HL7702在含20% 小牛血清的1640培养液培养2 d,改用无血清培养并TGF-β1分别诱导24 h,48 h,72 h;观察诱导前后细胞的形态学变化,实时荧光定量RT-PCR及蛋白质免疫印迹技术分析细胞中EMT相关基因和蛋白表达情况.结果:显微镜下观察到TGF-β1诱导前,肝细胞是不规则的六边形,诱导后细胞形态拉长变成纺锤形,细胞间隙变大;实时荧光定量RT-PCR和免疫印迹显示上皮化标志物E-钙黏附蛋白在TGF-β1诱导后的细胞中表达显著下降,而间质化标志物N-钙黏附蛋白、波形蛋白和Twist却显著增加.结论:正常人类肝细胞株HL7702经重组人TGF-β1的诱导发生上皮间质转化,这为深入研究TGF-β1和肝纤维化之间的关系奠定了基础.
目的:探討體外培養的人肝細胞繫在重組人轉化生長因子β1(TGF-β1)誘導下是否髮生上皮-間質轉化(epithelial-mesenchyme transition,EMT)以及相關標誌物的錶達變化.方法:人類肝細胞HL7702在含20% 小牛血清的1640培養液培養2 d,改用無血清培養併TGF-β1分彆誘導24 h,48 h,72 h;觀察誘導前後細胞的形態學變化,實時熒光定量RT-PCR及蛋白質免疫印跡技術分析細胞中EMT相關基因和蛋白錶達情況.結果:顯微鏡下觀察到TGF-β1誘導前,肝細胞是不規則的六邊形,誘導後細胞形態拉長變成紡錘形,細胞間隙變大;實時熒光定量RT-PCR和免疫印跡顯示上皮化標誌物E-鈣黏附蛋白在TGF-β1誘導後的細胞中錶達顯著下降,而間質化標誌物N-鈣黏附蛋白、波形蛋白和Twist卻顯著增加.結論:正常人類肝細胞株HL7702經重組人TGF-β1的誘導髮生上皮間質轉化,這為深入研究TGF-β1和肝纖維化之間的關繫奠定瞭基礎.
목적:탐토체외배양적인간세포계재중조인전화생장인자β1(TGF-β1)유도하시부발생상피-간질전화(epithelial-mesenchyme transition,EMT)이급상관표지물적표체변화.방법:인류간세포HL7702재함20% 소우혈청적1640배양액배양2 d,개용무혈청배양병TGF-β1분별유도24 h,48 h,72 h;관찰유도전후세포적형태학변화,실시형광정량RT-PCR급단백질면역인적기술분석세포중EMT상관기인화단백표체정황.결과:현미경하관찰도TGF-β1유도전,간세포시불규칙적륙변형,유도후세포형태랍장변성방추형,세포간극변대;실시형광정량RT-PCR화면역인적현시상피화표지물E-개점부단백재TGF-β1유도후적세포중표체현저하강,이간질화표지물N-개점부단백、파형단백화Twist각현저증가.결론:정상인류간세포주HL7702경중조인TGF-β1적유도발생상피간질전화,저위심입연구TGF-β1화간섬유화지간적관계전정료기출.
