山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
15期
1-4
,共4页
李杏%刘彬%周迎春%孙学刚%黄平%邱锦帆%刘紫庭
李杏%劉彬%週迎春%孫學剛%黃平%邱錦帆%劉紫庭
리행%류빈%주영춘%손학강%황평%구금범%류자정
热休克蛋白20%细胞凋亡%氧化应激
熱休剋蛋白20%細胞凋亡%氧化應激
열휴극단백20%세포조망%양화응격
目的 构建过表达大鼠热休克蛋白20(HSP20)基因慢病毒载体,探讨其对H2O2诱导的大鼠H9C2心肌细胞凋亡的影响.方法 构建大鼠HSP20基因pHIV-HSP20过表达质粒慢病毒,与包装质粒psPAX2、pMD2G共转染293FT细胞,检测其转染效率；包装慢病毒并转染H9C2心肌细胞；72 h后观察其转染效率,RT-PCR法检测细胞HSP20 mRNA表达,CCK-8、Hochest33258染色法检测H2O2诱导后H9C2心肌细胞凋亡情况.结果 成功构建了HSP20慢病毒过表达载体,经293FT细胞包装后,其对H9C2细胞72h的转染效率为95％；与慢性病毒组比较,H9C2细胞转染72 h后HSP20 mRNA水平显著升高,细胞活力下降,心肌细胞凋亡率明显降低(P均＜0.01).结论 过表达HSP20能显著抑制H2O2诱导的H9C2心肌细胞凋亡.
目的 構建過錶達大鼠熱休剋蛋白20(HSP20)基因慢病毒載體,探討其對H2O2誘導的大鼠H9C2心肌細胞凋亡的影響.方法 構建大鼠HSP20基因pHIV-HSP20過錶達質粒慢病毒,與包裝質粒psPAX2、pMD2G共轉染293FT細胞,檢測其轉染效率；包裝慢病毒併轉染H9C2心肌細胞；72 h後觀察其轉染效率,RT-PCR法檢測細胞HSP20 mRNA錶達,CCK-8、Hochest33258染色法檢測H2O2誘導後H9C2心肌細胞凋亡情況.結果 成功構建瞭HSP20慢病毒過錶達載體,經293FT細胞包裝後,其對H9C2細胞72h的轉染效率為95％；與慢性病毒組比較,H9C2細胞轉染72 h後HSP20 mRNA水平顯著升高,細胞活力下降,心肌細胞凋亡率明顯降低(P均＜0.01).結論 過錶達HSP20能顯著抑製H2O2誘導的H9C2心肌細胞凋亡.
목적 구건과표체대서열휴극단백20(HSP20)기인만병독재체,탐토기대H2O2유도적대서H9C2심기세포조망적영향.방법 구건대서HSP20기인pHIV-HSP20과표체질립만병독,여포장질립psPAX2、pMD2G공전염293FT세포,검측기전염효솔；포장만병독병전염H9C2심기세포；72 h후관찰기전염효솔,RT-PCR법검측세포HSP20 mRNA표체,CCK-8、Hochest33258염색법검측H2O2유도후H9C2심기세포조망정황.결과 성공구건료HSP20만병독과표체재체,경293FT세포포장후,기대H9C2세포72h적전염효솔위95％；여만성병독조비교,H9C2세포전염72 h후HSP20 mRNA수평현저승고,세포활력하강,심기세포조망솔명현강저(P균＜0.01).결론 과표체HSP20능현저억제H2O2유도적H9C2심기세포조망.
