中华肾脏病杂志
中華腎髒病雜誌
중화신장병잡지
2008年
1期
13-17
,共5页
结缔组织生长因子%成肌纤维细胞%Ⅰ型胶原%ERK1/2信号通路
結締組織生長因子%成肌纖維細胞%Ⅰ型膠原%ERK1/2信號通路
결체조직생장인자%성기섬유세포%Ⅰ형효원%ERK1/2신호통로
目的 观察结缔组织生长因子(CTGF)对大鼠肾脏成肌纤维细胞增殖及细胞外基质(ECM)成分Ⅰ型胶原生成的影响,并探讨ERK1/2途径在其中的作用.方法 原代培养肾皮质成肌纤维细胞,应用5'-溴-2'-脱氧尿嘧啶(BrdU)掺入法和细胞计数法检测细胞增殖;Western印迹法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原的蛋白水平及细胞内ERK1/2的磷酸化水平.结果 CTGF明显促进成肌纤维细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性,100 μg/L组第4天时,细胞数为对照组的1.6倍(P＜0.05).CTGF刺激可显著增加培养上清液中Ⅰ型胶原的蛋白水平[为对照组的(2.6±1.2)倍,P＜0.05].CTGF刺激细胞5 min后ERK1/2即发生磷酸化,持续至15 min,30 min以后迅速降至基础水平.用ERK1/2阻断剂PD98059预处理30 min后,CTGF促进细胞增殖效应(7%±5%比85%±7%,P＜0.01)和促Ⅰ型胶原分泌作用(1.0±0.1比1.6±0.3,P＜0.05)被显著抑制.结论 CTGF能够促进成肌纤维细胞的增殖和Ⅰ型胶原的分泌,其作用可能通过ERK1/2信号通路实现.
目的 觀察結締組織生長因子(CTGF)對大鼠腎髒成肌纖維細胞增殖及細胞外基質(ECM)成分Ⅰ型膠原生成的影響,併探討ERK1/2途徑在其中的作用.方法 原代培養腎皮質成肌纖維細胞,應用5'-溴-2'-脫氧尿嘧啶(BrdU)摻入法和細胞計數法檢測細胞增殖;Western印跡法檢測細胞上清液中Ⅰ型膠原的蛋白水平及細胞內ERK1/2的燐痠化水平.結果 CTGF明顯促進成肌纖維細胞的增殖,呈時間和劑量依賴性,100 μg/L組第4天時,細胞數為對照組的1.6倍(P＜0.05).CTGF刺激可顯著增加培養上清液中Ⅰ型膠原的蛋白水平[為對照組的(2.6±1.2)倍,P＜0.05].CTGF刺激細胞5 min後ERK1/2即髮生燐痠化,持續至15 min,30 min以後迅速降至基礎水平.用ERK1/2阻斷劑PD98059預處理30 min後,CTGF促進細胞增殖效應(7%±5%比85%±7%,P＜0.01)和促Ⅰ型膠原分泌作用(1.0±0.1比1.6±0.3,P＜0.05)被顯著抑製.結論 CTGF能夠促進成肌纖維細胞的增殖和Ⅰ型膠原的分泌,其作用可能通過ERK1/2信號通路實現.
목적 관찰결체조직생장인자(CTGF)대대서신장성기섬유세포증식급세포외기질(ECM)성분Ⅰ형효원생성적영향,병탐토ERK1/2도경재기중적작용.방법 원대배양신피질성기섬유세포,응용5'-추-2'-탈양뇨밀정(BrdU)참입법화세포계수법검측세포증식;Western인적법검측세포상청액중Ⅰ형효원적단백수평급세포내ERK1/2적린산화수평.결과 CTGF명현촉진성기섬유세포적증식,정시간화제량의뢰성,100 μg/L조제4천시,세포수위대조조적1.6배(P＜0.05).CTGF자격가현저증가배양상청액중Ⅰ형효원적단백수평[위대조조적(2.6±1.2)배,P＜0.05].CTGF자격세포5 min후ERK1/2즉발생린산화,지속지15 min,30 min이후신속강지기출수평.용ERK1/2조단제PD98059예처리30 min후,CTGF촉진세포증식효응(7%±5%비85%±7%,P＜0.01)화촉Ⅰ형효원분비작용(1.0±0.1비1.6±0.3,P＜0.05)피현저억제.결론 CTGF능구촉진성기섬유세포적증식화Ⅰ형효원적분비,기작용가능통과ERK1/2신호통로실현.
