武汉大学学报(理学版)
武漢大學學報(理學版)
무한대학학보(이학판)
JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY(Natural Science Edition)
2003年
4期
509-513
,共5页
黄玉屏%刘义%高振霆%沈萍
黃玉屏%劉義%高振霆%瀋萍
황옥병%류의%고진정%침평
启动子%微量热法%古生菌
啟動子%微量熱法%古生菌
계동자%미량열법%고생균
用微量热法研究了大肠杆菌HB101及其重组菌株的代谢特征.将不同大小的来源于嗜盐古生菌染色体DNA的启动子片段插入启动子探针载体中的氯霉素抗性基因前,获得重组菌株.结果表明重组菌株的半抑制浓度与DNA片段的启动功能大小是一致的,并且质粒的复制几乎不影响菌株的生长及代谢.培养基中加入氯霉素后,启动子启动氯霉素抗性基因表达,生长速率(k)降低,最大峰的出现时间(tp)延长,最大峰值(pm)也随之降低.在一定范围内,抗生素浓度与tp、pm呈线性关系.本研究结果直接证明了来自嗜盐古生菌的RM07、RM08和RM13片段在大肠杆菌中是有启动功能的,而且还表明基因表达量的高低与释放的代谢热变化相一致.因此微量热技术有可能为检测古生菌基因表达及其调控以及揭示古生菌这一特殊生命体的遗传和代谢特征提供一种新的灵敏的方法.
用微量熱法研究瞭大腸桿菌HB101及其重組菌株的代謝特徵.將不同大小的來源于嗜鹽古生菌染色體DNA的啟動子片段插入啟動子探針載體中的氯黴素抗性基因前,穫得重組菌株.結果錶明重組菌株的半抑製濃度與DNA片段的啟動功能大小是一緻的,併且質粒的複製幾乎不影響菌株的生長及代謝.培養基中加入氯黴素後,啟動子啟動氯黴素抗性基因錶達,生長速率(k)降低,最大峰的齣現時間(tp)延長,最大峰值(pm)也隨之降低.在一定範圍內,抗生素濃度與tp、pm呈線性關繫.本研究結果直接證明瞭來自嗜鹽古生菌的RM07、RM08和RM13片段在大腸桿菌中是有啟動功能的,而且還錶明基因錶達量的高低與釋放的代謝熱變化相一緻.因此微量熱技術有可能為檢測古生菌基因錶達及其調控以及揭示古生菌這一特殊生命體的遺傳和代謝特徵提供一種新的靈敏的方法.
용미량열법연구료대장간균HB101급기중조균주적대사특정.장불동대소적래원우기염고생균염색체DNA적계동자편단삽입계동자탐침재체중적록매소항성기인전,획득중조균주.결과표명중조균주적반억제농도여DNA편단적계동공능대소시일치적,병차질립적복제궤호불영향균주적생장급대사.배양기중가입록매소후,계동자계동록매소항성기인표체,생장속솔(k)강저,최대봉적출현시간(tp)연장,최대봉치(pm)야수지강저.재일정범위내,항생소농도여tp、pm정선성관계.본연구결과직접증명료래자기염고생균적RM07、RM08화RM13편단재대장간균중시유계동공능적,이차환표명기인표체량적고저여석방적대사열변화상일치.인차미량열기술유가능위검측고생균기인표체급기조공이급게시고생균저일특수생명체적유전화대사특정제공일충신적령민적방법.