中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2006年
1期
51-55
,共5页
余光清%刘文琪%雷家慧%莫红梅%程喻力%李雍龙
餘光清%劉文琪%雷傢慧%莫紅梅%程喻力%李雍龍
여광청%류문기%뢰가혜%막홍매%정유력%리옹룡
日本血吸虫%谷胱甘肽s-转移酶%DNA疫苗%重组蛋白%联合免疫
日本血吸蟲%穀胱甘肽s-轉移酶%DNA疫苗%重組蛋白%聯閤免疫
일본혈흡충%곡광감태s-전이매%DNA역묘%중조단백%연합면역
目的观察日本血吸虫Mr 26 000谷胱甘肽S-转移酶(Sj26)DNA疫苗和重组蛋白(rSj26 GST)疫苗联合免疫对小鼠的保护作用.方法将Sj26基因克隆入含有增强型绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N3,构建重组质粒pEGFP-Sj26,并转染幼仓鼠肾细胞(BHK),用荧光显微镜和蛋白质印迹法(Westem blotting)检测蛋白的表达.联合免疫组BALB/c小鼠分别在第0、2周用pEGFP-Sj26免疫2次,第4周再用rSj26 GST加强免疫1次;而单独免疫的pEGFP-Sj26组及rSj26 GST组,与上组同步各自免疫3次.末次免疫后2周进行感染攻击,45 d后剖杀,计数成虫及肝内虫卵.同时设PBS对照组.结果pEGFP-Sj26在BHK中能有效表达.联合免疫组的减虫率为50.8%,显著高于pEGFP-Sj26(28.0%)和rSj26 GST组(25.5%)(P值均＜0.01).联合免疫组以及pEGFP-Sj26、rSj26 GST组减卵率分别为32.7%、20.6%、33.0%;联合免疫组及rSj26 GST组,肝组织中每条雌虫平均产卵数显著低于PBS对照组(P值均＜0.01).结论联合免疫组的保护作用优于pEGFP-Sj26和rSj26 GST单独免疫组.
目的觀察日本血吸蟲Mr 26 000穀胱甘肽S-轉移酶(Sj26)DNA疫苗和重組蛋白(rSj26 GST)疫苗聯閤免疫對小鼠的保護作用.方法將Sj26基因剋隆入含有增彊型綠色熒光蛋白的真覈錶達載體pEGFP-N3,構建重組質粒pEGFP-Sj26,併轉染幼倉鼠腎細胞(BHK),用熒光顯微鏡和蛋白質印跡法(Westem blotting)檢測蛋白的錶達.聯閤免疫組BALB/c小鼠分彆在第0、2週用pEGFP-Sj26免疫2次,第4週再用rSj26 GST加彊免疫1次;而單獨免疫的pEGFP-Sj26組及rSj26 GST組,與上組同步各自免疫3次.末次免疫後2週進行感染攻擊,45 d後剖殺,計數成蟲及肝內蟲卵.同時設PBS對照組.結果pEGFP-Sj26在BHK中能有效錶達.聯閤免疫組的減蟲率為50.8%,顯著高于pEGFP-Sj26(28.0%)和rSj26 GST組(25.5%)(P值均＜0.01).聯閤免疫組以及pEGFP-Sj26、rSj26 GST組減卵率分彆為32.7%、20.6%、33.0%;聯閤免疫組及rSj26 GST組,肝組織中每條雌蟲平均產卵數顯著低于PBS對照組(P值均＜0.01).結論聯閤免疫組的保護作用優于pEGFP-Sj26和rSj26 GST單獨免疫組.
목적관찰일본혈흡충Mr 26 000곡광감태S-전이매(Sj26)DNA역묘화중조단백(rSj26 GST)역묘연합면역대소서적보호작용.방법장Sj26기인극륭입함유증강형록색형광단백적진핵표체재체pEGFP-N3,구건중조질립pEGFP-Sj26,병전염유창서신세포(BHK),용형광현미경화단백질인적법(Westem blotting)검측단백적표체.연합면역조BALB/c소서분별재제0、2주용pEGFP-Sj26면역2차,제4주재용rSj26 GST가강면역1차;이단독면역적pEGFP-Sj26조급rSj26 GST조,여상조동보각자면역3차.말차면역후2주진행감염공격,45 d후부살,계수성충급간내충란.동시설PBS대조조.결과pEGFP-Sj26재BHK중능유효표체.연합면역조적감충솔위50.8%,현저고우pEGFP-Sj26(28.0%)화rSj26 GST조(25.5%)(P치균＜0.01).연합면역조이급pEGFP-Sj26、rSj26 GST조감란솔분별위32.7%、20.6%、33.0%;연합면역조급rSj26 GST조,간조직중매조자충평균산란수현저저우PBS대조조(P치균＜0.01).결론연합면역조적보호작용우우pEGFP-Sj26화rSj26 GST단독면역조.
