CAJ | 학술논문

目的探讨血管活性肠肽(VIP)对人脐血造血干细胞(HSC)向肝系分化的影响.方法采用免疫磁分选技术纯化人脐血CD34+细胞,流式细胞术鉴定纯度;VIP和混合因子(包括VIP、EGF、HGF)作用CD34+细胞后,酶联免疫化学法测定CD34+细胞及上清AFP水平,免疫细胞化学法检测CD34+细胞上肝系标志AFP、白蛋白(ALB)、细胞角质素19(CK-19)的表达,Western blot方法检测CD34+细胞上ALB表达;巢式RT-PCR方法检测CD34+细胞上AFP、ALB的mRNA表达,随机选送ALB产物测序.结果免疫组化结果显示CD34+细胞上不表达CK-19蛋白,但有AFP和ALB蛋白表达;VIP作用CD34+细胞14 d后, 细胞内的AFP质量浓度(165.00±8.51 pg/mL)较对照组(270.00±11.37 pg/mL)显著下降(P<0.05).Western blot显示VIP作用后CD34+细胞内ALB蛋白表达有减弱趋势.人脐血CD34+细胞表达了AFP mRNA和ALB mRNA,随机选取ALB产物测序与GeneBank中ALB基因序列完全相同.结论人脐血CD34+细胞表达肝系标志AFP、ALB,虽未见CK-19表达,但仍提示造血干细胞有向肝细胞横向分化的可能.VIP降低了人脐血CD34+细胞AFP及ALB表达.这种对造血干细胞内胚层细胞标志物表达的抑制,提示VIP对HSC向肝细胞横向分化具有抑制作用.
목적탐토혈관활성장태(VIP)대인제혈조혈간세포(HSC)향간계분화적영향.방법채용면역자분선기술순화인제혈CD34+세포,류식세포술감정순도;VIP화혼합인자(포괄VIP、EGF、HGF)작용CD34+세포후,매련면역화학법측정CD34+세포급상청AFP수평,면역세포화학법검측CD34+세포상간계표지AFP、백단백(ALB)、세포각질소19(CK-19)적표체,Western blot방법검측CD34+세포상ALB표체;소식RT-PCR방법검측CD34+세포상AFP、ALB적mRNA표체,수궤선송ALB산물측서.결과면역조화결과현시CD34+세포상불표체CK-19단백,단유AFP화ALB단백표체;VIP작용CD34+세포14 d후, 세포내적AFP질량농도(165.00±8.51 pg/mL)교대조조(270.00±11.37 pg/mL)현저하강(P<0.05).Western blot현시VIP작용후CD34+세포내ALB단백표체유감약추세.인제혈CD34+세포표체료AFP mRNA화ALB mRNA,수궤선취ALB산물측서여GeneBank중ALB기인서렬완전상동.결론인제혈CD34+세포표체간계표지AFP、ALB,수미견CK-19표체,단잉제시조혈간세포유향간세포횡향분화적가능.VIP강저료인제혈CD34+세포AFP급ALB표체.저충대조혈간세포내배층세포표지물표체적억제,제시VIP대HSC향간세포횡향분화구유억제작용.