siRNA靶向Her-2逆转录病毒载体构建及其在SKOV3中的表达
siRNA파향Her-2역전록병독재체구건급기재SKOV3중적표체
Construction of Recombinant Retroviral Vector of siRNA Specific for Her-2 and the Expression of Recombinant Vector in SKOV3
  • 万方数据
    肿瘤防治研究 종류방치연구
    CANCER RESEARCH ON PREVENTION AND TREATMENT
    2007年 4期 277-280,318 ,共5页

    周颖%凌斌%高婷%陈敏%冯定庆%程志祥%朱园园%赵卫东%石永云%王梅梅%祝怀平

    주영%릉빈%고정%진민%풍정경%정지상%주완완%조위동%석영운%왕매매%축부평

    Her-2%RNA干扰%逆转录病毒载体 Her-2%RNA榦擾%逆轉錄病毒載體
    Her-2%RNA간우%역전록병독재체
    目的 构建并鉴定Her-2特异性siRNA逆转录病毒载体,将其导入SKOV3卵巢癌细胞中,并初步筛选有效抑制Her-2表达的细胞株.方法 体外合成含针对Her-2特异基因序列的寡核苷酸并定向克隆入逆转录病毒载体RNAi-Ready pSIREN-RetroQ,构建的载体通过测序、酶切鉴定后,脂质体介导下转染到包装病毒细胞株PT67中,嘌呤霉素筛选并挑选细胞克隆,收获病毒上清,将病毒上清转染SKOV3中,经过嘌呤霉素筛选得到稳定抑制Her-2表达的SKOV3细胞株,并分别通过RT-PCR和免疫组化方法鉴定抑制Her-2表达的效果.结果 成功构建了重组逆转录病毒载体,转染包装病毒细胞株获得的病毒上清成功转染了SKOV3, 并且抑制了Her-2的表达.结论 抑制Her-2表达的SKOV3细胞株的建立,为观察转染siRNA的逆转录病毒表达载体的肿瘤细胞恶性生物学行为变化奠定了实验基础.
    목적 구건병감정Her-2특이성siRNA역전록병독재체,장기도입SKOV3란소암세포중,병초보사선유효억제Her-2표체적세포주.방법 체외합성함침대Her-2특이기인서렬적과핵감산병정향극륭입역전록병독재체RNAi-Ready pSIREN-RetroQ,구건적재체통과측서、매절감정후,지질체개도하전염도포장병독세포주PT67중,표령매소사선병도선세포극륭,수획병독상청,장병독상청전염SKOV3중,경과표령매소사선득도은정억제Her-2표체적SKOV3세포주,병분별통과RT-PCR화면역조화방법감정억제Her-2표체적효과.결과 성공구건료중조역전록병독재체,전염포장병독세포주획득적병독상청성공전염료SKOV3, 병차억제료Her-2적표체.결론 억제Her-2표체적SKOV3세포주적건립,위관찰전염siRNA적역전록병독표체재체적종류세포악성생물학행위변화전정료실험기출.
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