湘南学院学报（医学版）
湘南學院學報（醫學版）
상남학원학보（의학판）
JOURNAL OF XIANGNAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2007年
3期
1-3,7
,共4页
幽门螺杆菌%napA基因%基因重组%基因表达
幽門螺桿菌%napA基因%基因重組%基因錶達
유문라간균%napA기인%기인중조%기인표체
目的 构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)napA基因真核表达系统,了解其在小鼠肌细胞中的表达情况.方法根据GenBank中Hp napA基因序列(AF227075)和真核表达质粒多克隆位点序列设计引物,以Hp-RNA逆转录产物为模板,扩增Hp napA编码基因,用基因重组技术将目的基因定向克隆到pcDNA3多克隆位点上,转化大肠杆菌,经质粒扩增和DNA测序后,进行小鼠肌肉免疫、目的基因表达水平和抗体水平检测.结果 经双酶切、PCR和测序验证,真核表达质粒Hp napA/pcDNA3构建成功.动物实验结果表明:真核重组质粒在小鼠肌细胞内获良好表达,表达产物能刺激机体产生一定效价的抗体.结论 成功构建了Hp napA/pcDN3真核重组表达质粒;用以免疫小鼠,在小鼠肌细胞内获较好表达并具有免疫原性,有用于疫苗研究的潜在价值.
目的 構建幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)napA基因真覈錶達繫統,瞭解其在小鼠肌細胞中的錶達情況.方法根據GenBank中Hp napA基因序列(AF227075)和真覈錶達質粒多剋隆位點序列設計引物,以Hp-RNA逆轉錄產物為模闆,擴增Hp napA編碼基因,用基因重組技術將目的基因定嚮剋隆到pcDNA3多剋隆位點上,轉化大腸桿菌,經質粒擴增和DNA測序後,進行小鼠肌肉免疫、目的基因錶達水平和抗體水平檢測.結果 經雙酶切、PCR和測序驗證,真覈錶達質粒Hp napA/pcDNA3構建成功.動物實驗結果錶明:真覈重組質粒在小鼠肌細胞內穫良好錶達,錶達產物能刺激機體產生一定效價的抗體.結論 成功構建瞭Hp napA/pcDN3真覈重組錶達質粒;用以免疫小鼠,在小鼠肌細胞內穫較好錶達併具有免疫原性,有用于疫苗研究的潛在價值.
목적 구건유문라간균(Helicobacter pylori,Hp)napA기인진핵표체계통,료해기재소서기세포중적표체정황.방법근거GenBank중Hp napA기인서렬(AF227075)화진핵표체질립다극륭위점서렬설계인물,이Hp-RNA역전록산물위모판,확증Hp napA편마기인,용기인중조기술장목적기인정향극륭도pcDNA3다극륭위점상,전화대장간균,경질립확증화DNA측서후,진행소서기육면역、목적기인표체수평화항체수평검측.결과 경쌍매절、PCR화측서험증,진핵표체질립Hp napA/pcDNA3구건성공.동물실험결과표명:진핵중조질립재소서기세포내획량호표체,표체산물능자격궤체산생일정효개적항체.결론 성공구건료Hp napA/pcDN3진핵중조표체질립;용이면역소서,재소서기세포내획교호표체병구유면역원성,유용우역묘연구적잠재개치.
