江苏大学学报（自然科学版）
江囌大學學報（自然科學版）
강소대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2009年
4期
334-337,361
,共5页
陈晓明%陈寒青%王静%金征宇%徐学明
陳曉明%陳寒青%王靜%金徵宇%徐學明
진효명%진한청%왕정%금정우%서학명
内切菊粉酶%外切菊粉酶%酶活性%化学修饰%荧光光谱
內切菊粉酶%外切菊粉酶%酶活性%化學脩飾%熒光光譜
내절국분매%외절국분매%매활성%화학수식%형광광보
选用N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)、焦碳酸二乙酯(DEPC)、丁二酮(DIC)、氯氨-T(Ch-T)、碳二亚胺(EDC)、苯甲基磺酰氟(PMSF)和二硫苏糖醇(DTT)等化学修饰剂,通过对Aspergillus ficuum内切和外切菊粉酶进行修饰,以研究菊粉酶分子中氨基酸侧链基团对酶活性的影响.研究结果表明:内切菊粉酶和外切菊粉酶活性中心的必需氨基酸残基均含有色氨酸和羧基氨基酸,且内切和外切菊粉酶活性中心的色氨酸残基数目分别为1和2;组氨酸可能是酶活性中心的组成基团.荧光光谱法研究表明:内切菊粉酶的色氨酸残基比外切菊粉酶的色氨酸残基所处环境的极性大,对环境的变化更敏感,并且更加暴露,表明这两种酶具有不同的构象,这种构象上的差别可能是导致二者对底物菊粉作用机理不同的原因.
選用N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)、焦碳痠二乙酯(DEPC)、丁二酮(DIC)、氯氨-T(Ch-T)、碳二亞胺(EDC)、苯甲基磺酰氟(PMSF)和二硫囌糖醇(DTT)等化學脩飾劑,通過對Aspergillus ficuum內切和外切菊粉酶進行脩飾,以研究菊粉酶分子中氨基痠側鏈基糰對酶活性的影響.研究結果錶明:內切菊粉酶和外切菊粉酶活性中心的必需氨基痠殘基均含有色氨痠和羧基氨基痠,且內切和外切菊粉酶活性中心的色氨痠殘基數目分彆為1和2;組氨痠可能是酶活性中心的組成基糰.熒光光譜法研究錶明:內切菊粉酶的色氨痠殘基比外切菊粉酶的色氨痠殘基所處環境的極性大,對環境的變化更敏感,併且更加暴露,錶明這兩種酶具有不同的構象,這種構象上的差彆可能是導緻二者對底物菊粉作用機理不同的原因.
선용N-추대호박선아알(NBS)、초탄산이을지(DEPC)、정이동(DIC)、록안-T(Ch-T)、탄이아알(EDC)、분갑기광선불(PMSF)화이류소당순(DTT)등화학수식제,통과대Aspergillus ficuum내절화외절국분매진행수식,이연구국분매분자중안기산측련기단대매활성적영향.연구결과표명:내절국분매화외절국분매활성중심적필수안기산잔기균함유색안산화최기안기산,차내절화외절국분매활성중심적색안산잔기수목분별위1화2;조안산가능시매활성중심적조성기단.형광광보법연구표명:내절국분매적색안산잔기비외절국분매적색안산잔기소처배경적겁성대,대배경적변화경민감,병차경가폭로,표명저량충매구유불동적구상,저충구상상적차별가능시도치이자대저물국분작용궤리불동적원인.
