四川师范大学学报（自然科学版）
四川師範大學學報（自然科學版）
사천사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2010年
5期
679-683
,共5页
魏浩澈%徐志文%漆信桥%林华%朱玲%许雁峰%郭万柱
魏浩澈%徐誌文%漆信橋%林華%硃玲%許雁峰%郭萬柱
위호철%서지문%칠신교%림화%주령%허안봉%곽만주
PRRSV%ORF5%抗原表位%原核表达%免疫原性
PRRSV%ORF5%抗原錶位%原覈錶達%免疫原性
PRRSV%ORF5%항원표위%원핵표체%면역원성
为鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒SCM株(PRRSV-SCM)囊膜糖蛋白GP5的免疫原性,利用RT-PCR方法从PRRSV SCM株ORF5中扩增大小为231 bp的目的基因并构建表达载体PET32-GP5,将其转入大肠埃希菌Rosetta,运用IPTG通过条件优化诱导其表达.检测结果表明:最佳诱导条件为IPTG浓度1 mmol/L在37℃下作用5 h,表达大小约28 kU的融合蛋白.通过Western-blot和间接酶联免疫吸附试验检测表达蛋白,结果显示该原核表达的融合蛋白可与PRRSV阳性血清发生反应,证明该蛋白具有免疫反应性.这为将来研制检测试剂盒以及后续研究PRRSV亚单位疫苗提供了重要依据.
為鑒定豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒SCM株(PRRSV-SCM)囊膜糖蛋白GP5的免疫原性,利用RT-PCR方法從PRRSV SCM株ORF5中擴增大小為231 bp的目的基因併構建錶達載體PET32-GP5,將其轉入大腸埃希菌Rosetta,運用IPTG通過條件優化誘導其錶達.檢測結果錶明:最佳誘導條件為IPTG濃度1 mmol/L在37℃下作用5 h,錶達大小約28 kU的融閤蛋白.通過Western-blot和間接酶聯免疫吸附試驗檢測錶達蛋白,結果顯示該原覈錶達的融閤蛋白可與PRRSV暘性血清髮生反應,證明該蛋白具有免疫反應性.這為將來研製檢測試劑盒以及後續研究PRRSV亞單位疫苗提供瞭重要依據.
위감정저번식여호흡종합정병독SCM주(PRRSV-SCM)낭막당단백GP5적면역원성,이용RT-PCR방법종PRRSV SCM주ORF5중확증대소위231 bp적목적기인병구건표체재체PET32-GP5,장기전입대장애희균Rosetta,운용IPTG통과조건우화유도기표체.검측결과표명:최가유도조건위IPTG농도1 mmol/L재37℃하작용5 h,표체대소약28 kU적융합단백.통과Western-blot화간접매련면역흡부시험검측표체단백,결과현시해원핵표체적융합단백가여PRRSV양성혈청발생반응,증명해단백구유면역반응성.저위장래연제검측시제합이급후속연구PRRSV아단위역묘제공료중요의거.
