海洋湖沼通报
海洋湖沼通報
해양호소통보
TRANSACTIONS OF OCEANOLOGY AND LIMNOLOGY
2012年
1期
116-122
,共7页
刘冬梅%马晓磊%朱葆华%李斯%于文功%杨官品%潘克厚
劉鼕梅%馬曉磊%硃葆華%李斯%于文功%楊官品%潘剋厚
류동매%마효뢰%주보화%리사%우문공%양관품%반극후
三角褐指藻%△5脂肪酸去饱和酶%基因克隆%原核表达
三角褐指藻%△5脂肪痠去飽和酶%基因剋隆%原覈錶達
삼각갈지조%△5지방산거포화매%기인극륭%원핵표체
△5脂肪酸去饱和酶(△5 fatty acid desaturase)是合成花生四烯酸(AA)和EPA的关键醇.为了构建三角褐指藻△5脂肪酸去饱和酶基因(简称D5)的原核表达重组质粒,并实现在E.coli BL21(DE3)中的表达.本研究根据GenBank中三角褐指藻△5脂肪酸去饱和酶基因序列,设计引物,扩增该基因并插入到pET28a中,测序鉴定后,转化E,coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG 诱导表述,SDS-PAGE分析表达产物.结果表明pET28a-D5构建成功,IPTG能诱导D5特异性表达.
△5脂肪痠去飽和酶(△5 fatty acid desaturase)是閤成花生四烯痠(AA)和EPA的關鍵醇.為瞭構建三角褐指藻△5脂肪痠去飽和酶基因(簡稱D5)的原覈錶達重組質粒,併實現在E.coli BL21(DE3)中的錶達.本研究根據GenBank中三角褐指藻△5脂肪痠去飽和酶基因序列,設計引物,擴增該基因併插入到pET28a中,測序鑒定後,轉化E,coli BL21(DE3)感受態細胞,IPTG 誘導錶述,SDS-PAGE分析錶達產物.結果錶明pET28a-D5構建成功,IPTG能誘導D5特異性錶達.
△5지방산거포화매(△5 fatty acid desaturase)시합성화생사희산(AA)화EPA적관건순.위료구건삼각갈지조△5지방산거포화매기인(간칭D5)적원핵표체중조질립,병실현재E.coli BL21(DE3)중적표체.본연구근거GenBank중삼각갈지조△5지방산거포화매기인서렬,설계인물,확증해기인병삽입도pET28a중,측서감정후,전화E,coli BL21(DE3)감수태세포,IPTG 유도표술,SDS-PAGE분석표체산물.결과표명pET28a-D5구건성공,IPTG능유도D5특이성표체.
