基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2012年
4期
320-326
,共7页
梁湘%陆专灵%韦秉兴%冯健玲%屈达才%罗廷荣
樑湘%陸專靈%韋秉興%馮健玲%屈達纔%囉廷榮
량상%륙전령%위병흥%풍건령%굴체재%라정영
家蚕%脂肪酶%丝氨酸蛋白酶%克隆%表达
傢蠶%脂肪酶%絲氨痠蛋白酶%剋隆%錶達
가잠%지방매%사안산단백매%극륭%표체
本研究以优良杂交品种"两广二号"家蚕为试材,克隆了该杂交品种家蚕两个抗家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因:脂肪酶基因Bmlipase-1和丝氨酸蛋白酶基因BmSP-2,测序并分别与不同品种蚕的同源基因序列进行比较.结果显示,"两广二号"家蚕Bmlipase-1基因ORF长度为885 bp,编码294个氨基酸,BmSP-2扩增长度为855 bp,编码284个氨基酸;它们的核苷酸和推导氨基酸序列同源性皆达92%以上,Bmlipase-1更保守,同源性大于99%;"两广二号"家蚕的Bmlipase-1基因脂肪酶活化部位和BmSP-2基因酶催化三联体位点的氨基酸残基与不同品种蚕的完全相同.以上结果说明这两个抗病毒基因在蚕的遗传进化过程中高度保守,提示其可能在机体消化或者免疫防御方面起着重要生理作用.将这两个抗病毒基因在大肠杆菌BL21中进行融合表达,获得的融合Bmlipase-1和BmSP-2蛋白分子量分别为47 kD和42 kD左右.
本研究以優良雜交品種"兩廣二號"傢蠶為試材,剋隆瞭該雜交品種傢蠶兩箇抗傢蠶覈型多角體病毒(BmNPV)基因:脂肪酶基因Bmlipase-1和絲氨痠蛋白酶基因BmSP-2,測序併分彆與不同品種蠶的同源基因序列進行比較.結果顯示,"兩廣二號"傢蠶Bmlipase-1基因ORF長度為885 bp,編碼294箇氨基痠,BmSP-2擴增長度為855 bp,編碼284箇氨基痠;它們的覈苷痠和推導氨基痠序列同源性皆達92%以上,Bmlipase-1更保守,同源性大于99%;"兩廣二號"傢蠶的Bmlipase-1基因脂肪酶活化部位和BmSP-2基因酶催化三聯體位點的氨基痠殘基與不同品種蠶的完全相同.以上結果說明這兩箇抗病毒基因在蠶的遺傳進化過程中高度保守,提示其可能在機體消化或者免疫防禦方麵起著重要生理作用.將這兩箇抗病毒基因在大腸桿菌BL21中進行融閤錶達,穫得的融閤Bmlipase-1和BmSP-2蛋白分子量分彆為47 kD和42 kD左右.
본연구이우량잡교품충"량엄이호"가잠위시재,극륭료해잡교품충가잠량개항가잠핵형다각체병독(BmNPV)기인:지방매기인Bmlipase-1화사안산단백매기인BmSP-2,측서병분별여불동품충잠적동원기인서렬진행비교.결과현시,"량엄이호"가잠Bmlipase-1기인ORF장도위885 bp,편마294개안기산,BmSP-2확증장도위855 bp,편마284개안기산;타문적핵감산화추도안기산서렬동원성개체92%이상,Bmlipase-1경보수,동원성대우99%;"량엄이호"가잠적Bmlipase-1기인지방매활화부위화BmSP-2기인매최화삼련체위점적안기산잔기여불동품충잠적완전상동.이상결과설명저량개항병독기인재잠적유전진화과정중고도보수,제시기가능재궤체소화혹자면역방어방면기착중요생리작용.장저량개항병독기인재대장간균BL21중진행융합표체,획득적융합Bmlipase-1화BmSP-2단백분자량분별위47 kD화42 kD좌우.
