中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2004年
5期
431-434
,共4页
何燕%叶林柏%李礼%廖庆姣%特马力%佘应龙%叶力%吴正辉
何燕%葉林柏%李禮%廖慶姣%特馬力%佘應龍%葉力%吳正輝
하연%협림백%리례%료경교%특마력%사응룡%협력%오정휘
输血传播病毒(TTV)ORF2%GFP%VP2%PI%蛋白质定位
輸血傳播病毒(TTV)ORF2%GFP%VP2%PI%蛋白質定位
수혈전파병독(TTV)ORF2%GFP%VP2%PI%단백질정위
应用PCR方法从含有TTVirus ORF2的质粒pET-His-TTV2中扩增出606bp的蛋白质编码区,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1中以表达成GFP-VP2融合蛋白.构建出的重组质粒pEGFPTTV2经过酶切分析和PCR鉴定.用脂质体介导法将pEGFPTTV2质粒DNA转染Cos7细胞,通过RT-PCR分析,证实细胞中存在ORF2基因的转录产物.用共聚焦显微镜结合PI染色技术研究TTV VP2蛋白在细胞中的分布情况.结果表明,TTV VP2分布在细胞质中和细胞核膜内侧.因此推测VP2作为一种非结构蛋白,功能可能是参与病毒DNA的复制或转录.
應用PCR方法從含有TTVirus ORF2的質粒pET-His-TTV2中擴增齣606bp的蛋白質編碼區,併將其剋隆到真覈錶達載體pEGFP-N1中以錶達成GFP-VP2融閤蛋白.構建齣的重組質粒pEGFPTTV2經過酶切分析和PCR鑒定.用脂質體介導法將pEGFPTTV2質粒DNA轉染Cos7細胞,通過RT-PCR分析,證實細胞中存在ORF2基因的轉錄產物.用共聚焦顯微鏡結閤PI染色技術研究TTV VP2蛋白在細胞中的分佈情況.結果錶明,TTV VP2分佈在細胞質中和細胞覈膜內側.因此推測VP2作為一種非結構蛋白,功能可能是參與病毒DNA的複製或轉錄.
응용PCR방법종함유TTVirus ORF2적질립pET-His-TTV2중확증출606bp적단백질편마구,병장기극륭도진핵표체재체pEGFP-N1중이표체성GFP-VP2융합단백.구건출적중조질립pEGFPTTV2경과매절분석화PCR감정.용지질체개도법장pEGFPTTV2질립DNA전염Cos7세포,통과RT-PCR분석,증실세포중존재ORF2기인적전록산물.용공취초현미경결합PI염색기술연구TTV VP2단백재세포중적분포정황.결과표명,TTV VP2분포재세포질중화세포핵막내측.인차추측VP2작위일충비결구단백,공능가능시삼여병독DNA적복제혹전록.
