中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2005年
9期
783-787,832
,共6页
欧山海%吴婷%何水珍%伍小路%郑舟%张军%夏宁邵
歐山海%吳婷%何水珍%伍小路%鄭舟%張軍%夏寧邵
구산해%오정%하수진%오소로%정주%장군%하저소
丙型肝炎病毒%内部核糖体进入位点%真核表达载体%双顺反子
丙型肝炎病毒%內部覈糖體進入位點%真覈錶達載體%雙順反子
병형간염병독%내부핵당체진입위점%진핵표체재체%쌍순반자
目的利用丙型肝炎病毒(HCV)的内部核糖体进入位点(IRES)元件构建一个新的真核双顺反子表达载体.方法克隆包含HCV 5'非编码区18nt开始到HCV CORE区编码基因的32nt的IRES序列替换商用载体pIRES中脑心肌炎病毒(EMCV)的IRES序列,构建真核双顺反子表达载体pCVIR,再将绿色荧光蛋白(GFP)和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因分别克隆到pIRES和pCVIR中的IRES的上下游,用流式细胞仪检测GFP的表达强度,ELISA法检测HBsAg的表达,比较两者的表达效率.结果pCVIR载体对IRES下游GFP和HBsAg的表达效率高于pIRES载体.结论构建了一个高效的真核双顺反子表达载体.
目的利用丙型肝炎病毒(HCV)的內部覈糖體進入位點(IRES)元件構建一箇新的真覈雙順反子錶達載體.方法剋隆包含HCV 5'非編碼區18nt開始到HCV CORE區編碼基因的32nt的IRES序列替換商用載體pIRES中腦心肌炎病毒(EMCV)的IRES序列,構建真覈雙順反子錶達載體pCVIR,再將綠色熒光蛋白(GFP)和乙型肝炎病毒錶麵抗原(HBsAg)基因分彆剋隆到pIRES和pCVIR中的IRES的上下遊,用流式細胞儀檢測GFP的錶達彊度,ELISA法檢測HBsAg的錶達,比較兩者的錶達效率.結果pCVIR載體對IRES下遊GFP和HBsAg的錶達效率高于pIRES載體.結論構建瞭一箇高效的真覈雙順反子錶達載體.
목적이용병형간염병독(HCV)적내부핵당체진입위점(IRES)원건구건일개신적진핵쌍순반자표체재체.방법극륭포함HCV 5'비편마구18nt개시도HCV CORE구편마기인적32nt적IRES서렬체환상용재체pIRES중뇌심기염병독(EMCV)적IRES서렬,구건진핵쌍순반자표체재체pCVIR,재장록색형광단백(GFP)화을형간염병독표면항원(HBsAg)기인분별극륭도pIRES화pCVIR중적IRES적상하유,용류식세포의검측GFP적표체강도,ELISA법검측HBsAg적표체,비교량자적표체효솔.결과pCVIR재체대IRES하유GFP화HBsAg적표체효솔고우pIRES재체.결론구건료일개고효적진핵쌍순반자표체재체.
