CAJ | 학술논문

ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFAs)是一类被广泛研究和关注的脂肪酸,对人类及其他哺乳动物的正常发育和保持良好的健康状况极其重要,并且对于人类的多种疾病的预防和治疗亦有着明显的作用.在人和哺乳动物体内,ω-3 PUFAs的含量与ω-6 PUFAs(其代谢方式和功能与前者不同,通常其作用也相反)相比很低.而对于人体,无论ω-3 PUFAs的过低还是ω-6 PUFAs的过高都会带来极为不利的影响.所以人们一直在努力寻求提高人体中ω-3 PUFAs含量的途径或者大量生产ω-3 PUFAs的方法.本研究经过密码子优化后,用化学合成的方法获得了C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1,并构建了哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1-sFat1-EGFP,通过脂质体转染了CHO细胞系并对其进行抗性筛选获得稳定转染细胞株.对稳定转染sFat-1细胞株的RT-PCR分析及脂肪酸组成的GC-MS分析表明,sFat1基因完全能够在CHO细胞中表达和发挥其ω-3去饱和酶的作用,即促使ω-6系列不饱和脂肪酸转变为相应的ω-3系列不饱和脂肪酸(从十八碳到二十二碳).ω-6不饱和脂肪酸总量从48.97%下降到35.29%,而ω-3不饱和脂肪酸总量则相应地从7.86%上升到24.02%.ω-6多不饱和脂肪酸和ω-3多不饱和脂肪酸的比值从正常细胞中的6.23下降到转染细胞中的1.47.这说明C.briggsae的ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1的合成是成功的,试验所获得的结果为今后的进一步的研究或应用其大量生产ω-3 PUFAs奠定了基础.
ω-3다불포화지방산(ω-3 PUFAs)시일류피엄범연구화관주적지방산,대인류급기타포유동물적정상발육화보지량호적건강상황겁기중요,병차대우인류적다충질병적예방화치료역유착명현적작용.재인화포유동물체내,ω-3 PUFAs적함량여ω-6 PUFAs(기대사방식화공능여전자불동,통상기작용야상반)상비흔저.이대우인체,무론ω-3 PUFAs적과저환시ω-6 PUFAs적과고도회대래겁위불리적영향.소이인문일직재노력심구제고인체중ω-3 PUFAs함량적도경혹자대량생산ω-3 PUFAs적방법.본연구경과밀마자우화후,용화학합성적방법획득료C.briggsae적ω-3지방산거포화매기인sFat-1,병구건료포유동물세포표체재체pcDNA3.1-sFat1-EGFP,통과지질체전염료CHO세포계병대기진행항성사선획득은정전염세포주.대은정전염sFat-1세포주적RT-PCR분석급지방산조성적GC-MS분석표명,sFat1기인완전능구재CHO세포중표체화발휘기ω-3거포화매적작용,즉촉사ω-6계렬불포화지방산전변위상응적ω-3계렬불포화지방산(종십팔탄도이십이탄).ω-6불포화지방산총량종48.97%하강도35.29%,이ω-3불포화지방산총량칙상응지종7.86%상승도24.02%.ω-6다불포화지방산화ω-3다불포화지방산적비치종정상세포중적6.23하강도전염세포중적1.47.저설명C.briggsae적ω-3지방산거포화매기인sFat-1적합성시성공적,시험소획득적결과위금후적진일보적연구혹응용기대량생산ω-3 PUFAs전정료기출.