河北理工大学学报(自然科学版)
河北理工大學學報(自然科學版)
하북리공대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF HEBEI POLYTECHNIC UNIVERSITY(Natural Science Edition)
2010年
2期
75-78,83
,共5页
贾长虹%唐红梅%常丽新%张一江
賈長虹%唐紅梅%常麗新%張一江
가장홍%당홍매%상려신%장일강
蛋白质复性%溶菌酶%人工伴侣
蛋白質複性%溶菌酶%人工伴侶
단백질복성%용균매%인공반려
为了获得人工伴侣辅助蛋白质复性方法的广泛应用,本文以二硫苏糖醇还原、盐酸胍变性的溶菌酶为目标蛋白质,优化复性过程中的一些条件.首先确定了溶菌酶浓度为0.06 mg/mL时,复性的最佳氧化还原体系GSSG/GSH均为3 mmol/L;然后证明了要达到较高的复性收率,在水浴环境下,需要较长的时间和较大的β-CD浓度(24 h,CTAB/β-CD为1.2 mmol/L:14.4 mmol/L),收率可达90%以上.而在摇床环境下,利用较短时间和较低的β-CD浓度(1 h,CTAB/β-CD为1.2 mmol/L:4.8 mmol/L)就可以达到一定的复性收率(70%以上);进一步实验证明,若想在1 h内达到理想的复性效果,可以选用1.2 mmol/L:4.8 mmol/L的CTAB/β-CD,摇动10 min,然后保持静止,可达到70%以上的收率.
為瞭穫得人工伴侶輔助蛋白質複性方法的廣汎應用,本文以二硫囌糖醇還原、鹽痠胍變性的溶菌酶為目標蛋白質,優化複性過程中的一些條件.首先確定瞭溶菌酶濃度為0.06 mg/mL時,複性的最佳氧化還原體繫GSSG/GSH均為3 mmol/L;然後證明瞭要達到較高的複性收率,在水浴環境下,需要較長的時間和較大的β-CD濃度(24 h,CTAB/β-CD為1.2 mmol/L:14.4 mmol/L),收率可達90%以上.而在搖床環境下,利用較短時間和較低的β-CD濃度(1 h,CTAB/β-CD為1.2 mmol/L:4.8 mmol/L)就可以達到一定的複性收率(70%以上);進一步實驗證明,若想在1 h內達到理想的複性效果,可以選用1.2 mmol/L:4.8 mmol/L的CTAB/β-CD,搖動10 min,然後保持靜止,可達到70%以上的收率.
위료획득인공반려보조단백질복성방법적엄범응용,본문이이류소당순환원、염산고변성적용균매위목표단백질,우화복성과정중적일사조건.수선학정료용균매농도위0.06 mg/mL시,복성적최가양화환원체계GSSG/GSH균위3 mmol/L;연후증명료요체도교고적복성수솔,재수욕배경하,수요교장적시간화교대적β-CD농도(24 h,CTAB/β-CD위1.2 mmol/L:14.4 mmol/L),수솔가체90%이상.이재요상배경하,이용교단시간화교저적β-CD농도(1 h,CTAB/β-CD위1.2 mmol/L:4.8 mmol/L)취가이체도일정적복성수솔(70%이상);진일보실험증명,약상재1 h내체도이상적복성효과,가이선용1.2 mmol/L:4.8 mmol/L적CTAB/β-CD,요동10 min,연후보지정지,가체도70%이상적수솔.
