淮海工学院学报（自然科学版）
淮海工學院學報（自然科學版）
회해공학원학보（자연과학판）
JOURNAL OF HUAIHAI INSTITUTE OF TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCES EDITION)
2010年
2期
81-84
,共4页
周向红%阎斌伦%王萍%易乐飞
週嚮紅%閻斌倫%王萍%易樂飛
주향홍%염빈륜%왕평%역악비
条斑紫菜%HSP90基因%18S rRNA基因%实时荧光定量PCR%SYBR Green I
條斑紫菜%HSP90基因%18S rRNA基因%實時熒光定量PCR%SYBR Green I
조반자채%HSP90기인%18S rRNA기인%실시형광정량PCR%SYBR Green I
以管家基因18S rRNA为内参,采用SYBR Green I荧光染料法,构建了条斑紫菜 HSP90基因实时荧光定量PCR的检测方法,为条斑紫菜HSP90和18S rRNA基因筛选出定量引物各1对,获得的扩增曲线基线平整、指数区明显、斜率大且固定.两基因的熔解曲线显示单特异峰,Tm分别为88.5和85℃.两基因标准曲线的斜率分别为-3.307和-3.308,扩增效率都约为100.6%,Ct值在13～32范围内有良好的线性关系.构建的实时荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强,准确可靠、重复性好,检测周期短,为进一步研究HSP90基因在胁迫下的表达差异奠定了基础.
以管傢基因18S rRNA為內參,採用SYBR Green I熒光染料法,構建瞭條斑紫菜 HSP90基因實時熒光定量PCR的檢測方法,為條斑紫菜HSP90和18S rRNA基因篩選齣定量引物各1對,穫得的擴增麯線基線平整、指數區明顯、斜率大且固定.兩基因的鎔解麯線顯示單特異峰,Tm分彆為88.5和85℃.兩基因標準麯線的斜率分彆為-3.307和-3.308,擴增效率都約為100.6%,Ct值在13～32範圍內有良好的線性關繫.構建的實時熒光定量PCR檢測方法靈敏度高、特異性彊,準確可靠、重複性好,檢測週期短,為進一步研究HSP90基因在脅迫下的錶達差異奠定瞭基礎.
이관가기인18S rRNA위내삼,채용SYBR Green I형광염료법,구건료조반자채 HSP90기인실시형광정량PCR적검측방법,위조반자채HSP90화18S rRNA기인사선출정량인물각1대,획득적확증곡선기선평정、지수구명현、사솔대차고정.량기인적용해곡선현시단특이봉,Tm분별위88.5화85℃.량기인표준곡선적사솔분별위-3.307화-3.308,확증효솔도약위100.6%,Ct치재13～32범위내유량호적선성관계.구건적실시형광정량PCR검측방법령민도고、특이성강,준학가고、중복성호,검측주기단,위진일보연구HSP90기인재협박하적표체차이전정료기출.
