体育科学
體育科學
체육과학
SPORT SCIENCE
2011年
1期
29-38
,共10页
过度运动%中性粒细胞%活性氧%淋巴细胞%DNA损伤%干预%鼠%动物实验
過度運動%中性粒細胞%活性氧%淋巴細胞%DNA損傷%榦預%鼠%動物實驗
과도운동%중성립세포%활성양%림파세포%DNA손상%간예%서%동물실험
目的:探讨过度运动激活中性粒细胞NADPH氧化酶介导产生的活性氧(ROS)对淋巴细胞DNA损伤的影响及实施二联苯碘(DPI)干预作用.方法:30只雄性Vistar大鼠随机分为3组,安静组(C,n=10)、过度训练组(E,n=10)和DPI干预组(D,n=10),E组和D组进行递增负荷跑台训练11周,末次训练结束后在36~40 h内各组随机取8只眼眶静脉采血.应用ELISA方法检测血浆细胞因子水平及血液中脂质过氧化水平;提取白细胞用AnnexinV/PI双染色法流式测定中性粒细胞凋亡与坏死程度;免疫细胞化学的激光共聚焦法测定NADPH氧化酶关键亚基的gp91 phox与p47phox的共定位;单细胞凝胶电泳测定淋巴细胞的DNA损伤程度.结果:1)与C组比较.E组血浆IL-1b显著性升高,IL-8、TNF-α显著升高(分别为P<0.01和P<0.05),MCP-1与CINC显著性下降(P<0.05);而D组血浆IL-1b、MCP-1显著下降(P<0.05),IL-8、TNF-α显著性升高(P<0.05);E组和D组大鼠血浆慨、MPO水平均上升(分别为P<0.01和P<0.05);2)与C组相比,E组、D组中性粒细胞性凋亡的百分比均显著上升(P<0.01),但中性粒细胞的死亡数E组增加(P<0.05)而D组无显著变化;3)与C组比较,E组出现DNA损伤的彗星细胞数非常显著性升高(P<0.01),且彗星细胞的宽度和尾长的变化均达到显著性水平,而D组的变化均未达到显著性水平;4)中性粒细胞的共聚焦染色定位显示:与安静组对照比较,E组出现了NADPH氧化酶关键亚基的gp91phox与p47phox的共定位.结论:1)过度运动可引起外周血炎性因子和趋化分子分泌的增加,从而有可能诱发组织炎症的发生和而调节T淋巴细胞的分化;2)过度运动可激活外周血中性粒细胞的NADPH氧化酶介导产生过多的ROS使血液的脂质过氧化水平提高;3)由此途径产生的ROS的增多和血液过氧化水平的提高可能引起中性粒细胞本身的凋亡甚至死亡和淋巴细胞的DNA损伤:4)由此途径产生的ROS的增多、吞噬细胞及淋巴细胞的过氧化损伤、炎性因子及免疫调节因子的变化等多因素可调节细胞免疫,是过度运动引起的运动型免疫抑制的可能因素.
目的:探討過度運動激活中性粒細胞NADPH氧化酶介導產生的活性氧(ROS)對淋巴細胞DNA損傷的影響及實施二聯苯碘(DPI)榦預作用.方法:30隻雄性Vistar大鼠隨機分為3組,安靜組(C,n=10)、過度訓練組(E,n=10)和DPI榦預組(D,n=10),E組和D組進行遞增負荷跑檯訓練11週,末次訓練結束後在36~40 h內各組隨機取8隻眼眶靜脈採血.應用ELISA方法檢測血漿細胞因子水平及血液中脂質過氧化水平;提取白細胞用AnnexinV/PI雙染色法流式測定中性粒細胞凋亡與壞死程度;免疫細胞化學的激光共聚焦法測定NADPH氧化酶關鍵亞基的gp91 phox與p47phox的共定位;單細胞凝膠電泳測定淋巴細胞的DNA損傷程度.結果:1)與C組比較.E組血漿IL-1b顯著性升高,IL-8、TNF-α顯著升高(分彆為P<0.01和P<0.05),MCP-1與CINC顯著性下降(P<0.05);而D組血漿IL-1b、MCP-1顯著下降(P<0.05),IL-8、TNF-α顯著性升高(P<0.05);E組和D組大鼠血漿慨、MPO水平均上升(分彆為P<0.01和P<0.05);2)與C組相比,E組、D組中性粒細胞性凋亡的百分比均顯著上升(P<0.01),但中性粒細胞的死亡數E組增加(P<0.05)而D組無顯著變化;3)與C組比較,E組齣現DNA損傷的彗星細胞數非常顯著性升高(P<0.01),且彗星細胞的寬度和尾長的變化均達到顯著性水平,而D組的變化均未達到顯著性水平;4)中性粒細胞的共聚焦染色定位顯示:與安靜組對照比較,E組齣現瞭NADPH氧化酶關鍵亞基的gp91phox與p47phox的共定位.結論:1)過度運動可引起外週血炎性因子和趨化分子分泌的增加,從而有可能誘髮組織炎癥的髮生和而調節T淋巴細胞的分化;2)過度運動可激活外週血中性粒細胞的NADPH氧化酶介導產生過多的ROS使血液的脂質過氧化水平提高;3)由此途徑產生的ROS的增多和血液過氧化水平的提高可能引起中性粒細胞本身的凋亡甚至死亡和淋巴細胞的DNA損傷:4)由此途徑產生的ROS的增多、吞噬細胞及淋巴細胞的過氧化損傷、炎性因子及免疫調節因子的變化等多因素可調節細胞免疫,是過度運動引起的運動型免疫抑製的可能因素.
목적:탐토과도운동격활중성립세포NADPH양화매개도산생적활성양(ROS)대림파세포DNA손상적영향급실시이련분전(DPI)간예작용.방법:30지웅성Vistar대서수궤분위3조,안정조(C,n=10)、과도훈련조(E,n=10)화DPI간예조(D,n=10),E조화D조진행체증부하포태훈련11주,말차훈련결속후재36~40 h내각조수궤취8지안광정맥채혈.응용ELISA방법검측혈장세포인자수평급혈액중지질과양화수평;제취백세포용AnnexinV/PI쌍염색법류식측정중성립세포조망여배사정도;면역세포화학적격광공취초법측정NADPH양화매관건아기적gp91 phox여p47phox적공정위;단세포응효전영측정림파세포적DNA손상정도.결과:1)여C조비교.E조혈장IL-1b현저성승고,IL-8、TNF-α현저승고(분별위P<0.01화P<0.05),MCP-1여CINC현저성하강(P<0.05);이D조혈장IL-1b、MCP-1현저하강(P<0.05),IL-8、TNF-α현저성승고(P<0.05);E조화D조대서혈장개、MPO수평균상승(분별위P<0.01화P<0.05);2)여C조상비,E조、D조중성립세포성조망적백분비균현저상승(P<0.01),단중성립세포적사망수E조증가(P<0.05)이D조무현저변화;3)여C조비교,E조출현DNA손상적혜성세포수비상현저성승고(P<0.01),차혜성세포적관도화미장적변화균체도현저성수평,이D조적변화균미체도현저성수평;4)중성립세포적공취초염색정위현시:여안정조대조비교,E조출현료NADPH양화매관건아기적gp91phox여p47phox적공정위.결론:1)과도운동가인기외주혈염성인자화추화분자분비적증가,종이유가능유발조직염증적발생화이조절T림파세포적분화;2)과도운동가격활외주혈중성립세포적NADPH양화매개도산생과다적ROS사혈액적지질과양화수평제고;3)유차도경산생적ROS적증다화혈액과양화수평적제고가능인기중성립세포본신적조망심지사망화림파세포적DNA손상:4)유차도경산생적ROS적증다、탄서세포급림파세포적과양화손상、염성인자급면역조절인자적변화등다인소가조절세포면역,시과도운동인기적운동형면역억제적가능인소.