新疆农业大学学报
新疆農業大學學報
신강농업대학학보
JOURNAL OF XINJIANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
1期
53-58
,共6页
沙娜瓦尔·塔希%王传锋%买买提艾力·斯迪克%张伟%茹鲜古丽·木明%吴星星%冉多良
沙娜瓦爾·塔希%王傳鋒%買買提艾力·斯迪剋%張偉%茹鮮古麗·木明%吳星星%冉多良
사나와이·탑희%왕전봉%매매제애력·사적극%장위%여선고려·목명%오성성%염다량
重组质粒%重组N蛋白%猪繁殖与呼吸综合征病毒%间接ELISA检测方法
重組質粒%重組N蛋白%豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%間接ELISA檢測方法
중조질립%중조N단백%저번식여호흡종합정병독%간접ELISA검측방법
在最佳条件下,通过对重组质粒pGEX-6P-N进行诱导表达,并利用Glutathione Sepharose 4B亲和吸附柱对表达产物(重组N蛋白)进行纯化.用重组N蛋白作为包被抗原,通过对相关条件进行优化(如抗原包被量,血清稀释度,酶标二抗最佳工作浓度,底物作用时间等),确定判定标准,最终初步建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法.用建立的间接ELISA方法检测360份血清样品,并与IDEXX公司研制的ELISA试剂盒检测的结果相比较,批内重复性试验变异系数均值为1.52%,批间变异系数为6.17%,符合率达92.5%,试验表明,建立的间接ELISA检测方法具有良好的重复性和特异性,可用于PRRSV血清抗体的检测.
在最佳條件下,通過對重組質粒pGEX-6P-N進行誘導錶達,併利用Glutathione Sepharose 4B親和吸附柱對錶達產物(重組N蛋白)進行純化.用重組N蛋白作為包被抗原,通過對相關條件進行優化(如抗原包被量,血清稀釋度,酶標二抗最佳工作濃度,底物作用時間等),確定判定標準,最終初步建立瞭檢測PRRSV抗體的間接ELISA方法.用建立的間接ELISA方法檢測360份血清樣品,併與IDEXX公司研製的ELISA試劑盒檢測的結果相比較,批內重複性試驗變異繫數均值為1.52%,批間變異繫數為6.17%,符閤率達92.5%,試驗錶明,建立的間接ELISA檢測方法具有良好的重複性和特異性,可用于PRRSV血清抗體的檢測.
재최가조건하,통과대중조질립pGEX-6P-N진행유도표체,병이용Glutathione Sepharose 4B친화흡부주대표체산물(중조N단백)진행순화.용중조N단백작위포피항원,통과대상관조건진행우화(여항원포피량,혈청희석도,매표이항최가공작농도,저물작용시간등),학정판정표준,최종초보건립료검측PRRSV항체적간접ELISA방법.용건립적간접ELISA방법검측360빈혈청양품,병여IDEXX공사연제적ELISA시제합검측적결과상비교,비내중복성시험변이계수균치위1.52%,비간변이계수위6.17%,부합솔체92.5%,시험표명,건립적간접ELISA검측방법구유량호적중복성화특이성,가용우PRRSV혈청항체적검측.