中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2012年
3期
217-222
,共6页
孟双%白雪梅%王艳%叶长芸
孟雙%白雪梅%王豔%葉長蕓
맹쌍%백설매%왕염%협장예
嗜水气单胞菌%实时荧光TaqMan PCR%气溶素基因%丝氨酸蛋白酶基因
嗜水氣單胞菌%實時熒光TaqMan PCR%氣溶素基因%絲氨痠蛋白酶基因
기수기단포균%실시형광TaqMan PCR%기용소기인%사안산단백매기인
目的 建立针对嗜水气单胞菌的高灵敏、高特异的实时荧光三重TaqMan聚合酶链式反应(PCR)快速检测体系.方法 根据嗜水气单胞菌的16S rDNA、气溶素基因(aerA)和丝氨酸蛋白酶基因(ahp)的特异性序列设计引物及TaqMan探针,利用高通量实时荧光PCR检测平台探讨该检测体系的灵敏度;用29种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性.结果 实时荧光三重TaqMan PCR快速检测体系对嗜水气单胞菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系;对嗜水气单胞菌基因组的检测灵敏度为5×10-2 pg/反应体系;该体系的特异性引物探针在检测29种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现假阳性,整个反应在2 h内完成.结论 本研究建立的实时荧光三重TaqMan PCR检测体系可作为嗜水气单胞菌灵敏、特异、快速的检测方法,并同时评价嗜水气单胞菌的致病潜力.
目的 建立針對嗜水氣單胞菌的高靈敏、高特異的實時熒光三重TaqMan聚閤酶鏈式反應(PCR)快速檢測體繫.方法 根據嗜水氣單胞菌的16S rDNA、氣溶素基因(aerA)和絲氨痠蛋白酶基因(ahp)的特異性序列設計引物及TaqMan探針,利用高通量實時熒光PCR檢測平檯探討該檢測體繫的靈敏度;用29種其他腸道緻病菌及院內感染中常見的緻病菌評價該檢測體繫的特異性.結果 實時熒光三重TaqMan PCR快速檢測體繫對嗜水氣單胞菌重組質粒的檢測靈敏度為1×102拷貝/反應體繫;對嗜水氣單胞菌基因組的檢測靈敏度為5×10-2 pg/反應體繫;該體繫的特異性引物探針在檢測29種其他腸道緻病菌及院內感染中常見的緻病菌時未齣現假暘性,整箇反應在2 h內完成.結論 本研究建立的實時熒光三重TaqMan PCR檢測體繫可作為嗜水氣單胞菌靈敏、特異、快速的檢測方法,併同時評價嗜水氣單胞菌的緻病潛力.
목적 건립침대기수기단포균적고령민、고특이적실시형광삼중TaqMan취합매련식반응(PCR)쾌속검측체계.방법 근거기수기단포균적16S rDNA、기용소기인(aerA)화사안산단백매기인(ahp)적특이성서렬설계인물급TaqMan탐침,이용고통량실시형광PCR검측평태탐토해검측체계적령민도;용29충기타장도치병균급원내감염중상견적치병균평개해검측체계적특이성.결과 실시형광삼중TaqMan PCR쾌속검측체계대기수기단포균중조질립적검측령민도위1×102고패/반응체계;대기수기단포균기인조적검측령민도위5×10-2 pg/반응체계;해체계적특이성인물탐침재검측29충기타장도치병균급원내감염중상견적치병균시미출현가양성,정개반응재2 h내완성.결론 본연구건립적실시형광삼중TaqMan PCR검측체계가작위기수기단포균령민、특이、쾌속적검측방법,병동시평개기수기단포균적치병잠력.
