CAJ | 학술논문

目的构建pEGFP-N1-GGF2质粒,观察其在大鼠脑组织中的表达.方法采用RT-PCR方法从人胚胎脑组织总RNA中扩增出人GGF2全长序列,并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达载体pEGFP-N1上,构建pEGFP-N1-GGF2质粒,通过脂质体将pEGFP-N1-GGF2质粒转染大鼠脑组织,荧光显微镜下观察GGF2融合蛋白在大鼠脑内表达的时间和空间分布特征.结果成功构建了pEGFP-N1-GGF2表达载体,荧光显微镜观察可见,pEGFP-N1-GGF2表达载体转染6 h大鼠脑内即可见GGF2融合蛋白表达,3 d时融合蛋白表达最多.7 d时表达量稍有下降但仍高,14 d时表达量已明显下降.GGF2融合蛋白在脑内的表达以针道为中心向周围扩散,荧光信号可达皮层深部.结论脂质体介导的pEGFP-N1-GGF2质粒能够在大鼠脑内表达GGF2融合蛋白.
목적 구건pEGFP-N1-GGF2질립,관찰기재대서뇌조직중적표체.방법 채용RT-PCR방법종인배태뇌조직총RNA중확증출인GGF2전장서렬,병극륭도증강형록색형광단백(EGFP)기인진핵표체재체pEGFP-N1상,구건pEGFP-N1-GGF2질립,통과지질체장pEGFP-N1-GGF2질립전염대서뇌조직,형광현미경하관찰GGF2융합단백재대서뇌내표체적시간화공간분포특정.결과 성공구건료pEGFP-N1-GGF2표체재체,형광현미경관찰가견,pEGFP-N1-GGF2표체재체전염6 h대서뇌내즉가견GGF2융합단백표체,3 d시융합단백표체최다.7 d시표체량초유하강단잉고,14 d시표체량이명현하강.GGF2융합단백재뇌내적표체이침도위중심향주위확산,형광신호가체피층심부.결론 지질체개도적pEGFP-N1-GGF2질립능구재대서뇌내표체GGF2융합단백.