复旦学报（自然科学版）
複旦學報（自然科學版）
복단학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2004年
6期
1056-1060
,共5页
倪伟明%黄路标%王荫榆%刘国元%张伯生%任大明
倪偉明%黃路標%王蔭榆%劉國元%張伯生%任大明
예위명%황로표%왕음유%류국원%장백생%임대명
乳酸菌%粪肠球菌%启动子%pNZ8037%绿色荧光蛋白%共聚焦%口服疫苗
乳痠菌%糞腸毬菌%啟動子%pNZ8037%綠色熒光蛋白%共聚焦%口服疫苗
유산균%분장구균%계동자%pNZ8037%록색형광단백%공취초%구복역묘
粪肠球菌是乳酸菌的一个属. 采用生物信息学方法,预测了粪肠球菌AS1.2984基因组中乳酸脱氢酶和三磷酸甘油醛脱氢酶的组成型启动子序列. 设计引物通过PCR扩增得到这2段启动子序列,并克隆到乳酸菌-大肠杆菌穿梭质粒pNZ8037上,在启动子下游接上绿色荧光蛋白基因作为标记,构建乳酸菌的组成型蛋白表达质粒.通过电转化将上述改造过的pNZ8037质粒导入粪肠球菌中,在共聚焦显微镜中可以观察到绿色荧光蛋白的表达. 在乳酸菌MRS培养基中加入乳酸、盐酸、氢氧化钠等试剂,发现可以调节绿色荧光蛋白的表达量.
糞腸毬菌是乳痠菌的一箇屬. 採用生物信息學方法,預測瞭糞腸毬菌AS1.2984基因組中乳痠脫氫酶和三燐痠甘油醛脫氫酶的組成型啟動子序列. 設計引物通過PCR擴增得到這2段啟動子序列,併剋隆到乳痠菌-大腸桿菌穿梭質粒pNZ8037上,在啟動子下遊接上綠色熒光蛋白基因作為標記,構建乳痠菌的組成型蛋白錶達質粒.通過電轉化將上述改造過的pNZ8037質粒導入糞腸毬菌中,在共聚焦顯微鏡中可以觀察到綠色熒光蛋白的錶達. 在乳痠菌MRS培養基中加入乳痠、鹽痠、氫氧化鈉等試劑,髮現可以調節綠色熒光蛋白的錶達量.
분장구균시유산균적일개속. 채용생물신식학방법,예측료분장구균AS1.2984기인조중유산탈경매화삼린산감유철탈경매적조성형계동자서렬. 설계인물통과PCR확증득도저2단계동자서렬,병극륭도유산균-대장간균천사질립pNZ8037상,재계동자하유접상록색형광단백기인작위표기,구건유산균적조성형단백표체질립.통과전전화장상술개조과적pNZ8037질립도입분장구균중,재공취초현미경중가이관찰도록색형광단백적표체. 재유산균MRS배양기중가입유산、염산、경양화납등시제,발현가이조절록색형광단백적표체량.
