生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2007年
7期
754-759
,共6页
王佐%童中艺%周晓峰%姜志胜%唐朝克%宋砚明%田永凤
王佐%童中藝%週曉峰%薑誌勝%唐朝剋%宋硯明%田永鳳
왕좌%동중예%주효봉%강지성%당조극%송연명%전영봉
杂交瘤皿%分离%大鼠骨髓%内皮祖细胞%微孔法
雜交瘤皿%分離%大鼠骨髓%內皮祖細胞%微孔法
잡교류명%분리%대서골수%내피조세포%미공법
用一种杂交瘤皿,根据内皮祖细胞集落形成单位(endothelial progenitor cells colony-forming units,EPCs-CFUs)的形态特征和EPCs表面特异性标记物分离EPCs.取大鼠股骨、胫骨骨髓,将全骨髓接种在聚苯乙烯制作的杂交瘤皿上,培养4～7天后出现CFUs,将这些集落分别挑选出来后,取单个集落的部分细胞免疫荧光鉴定EPCs表面特异性标记物CD133/VEGFR-2.CD133/VEGFR-2双阳性即为EPCs-CFUs.与此对应的余下一部分继续传代增殖,流式细胞术鉴定CD133/VEGFR-2/CD34,并把此方法命名为微孔法.发现接种后第4天,显微镜下可见明显的CFUs.免疫荧光鉴定大约7%的CFUs为CD133+/VEGFR-2+,进一步传代培养,流式细胞术鉴定CD133+/VEGFR-2+/CD34+细胞纯度达70%以上.传代细胞可在体外形成血管样结构,并表达内皮细胞特异性标记物vWF.结果表明通过微孔法能成功地从大鼠骨髓分离到EPCs.
用一種雜交瘤皿,根據內皮祖細胞集落形成單位(endothelial progenitor cells colony-forming units,EPCs-CFUs)的形態特徵和EPCs錶麵特異性標記物分離EPCs.取大鼠股骨、脛骨骨髓,將全骨髓接種在聚苯乙烯製作的雜交瘤皿上,培養4～7天後齣現CFUs,將這些集落分彆挑選齣來後,取單箇集落的部分細胞免疫熒光鑒定EPCs錶麵特異性標記物CD133/VEGFR-2.CD133/VEGFR-2雙暘性即為EPCs-CFUs.與此對應的餘下一部分繼續傳代增殖,流式細胞術鑒定CD133/VEGFR-2/CD34,併把此方法命名為微孔法.髮現接種後第4天,顯微鏡下可見明顯的CFUs.免疫熒光鑒定大約7%的CFUs為CD133+/VEGFR-2+,進一步傳代培養,流式細胞術鑒定CD133+/VEGFR-2+/CD34+細胞純度達70%以上.傳代細胞可在體外形成血管樣結構,併錶達內皮細胞特異性標記物vWF.結果錶明通過微孔法能成功地從大鼠骨髓分離到EPCs.
용일충잡교류명,근거내피조세포집락형성단위(endothelial progenitor cells colony-forming units,EPCs-CFUs)적형태특정화EPCs표면특이성표기물분리EPCs.취대서고골、경골골수,장전골수접충재취분을희제작적잡교류명상,배양4～7천후출현CFUs,장저사집락분별도선출래후,취단개집락적부분세포면역형광감정EPCs표면특이성표기물CD133/VEGFR-2.CD133/VEGFR-2쌍양성즉위EPCs-CFUs.여차대응적여하일부분계속전대증식,류식세포술감정CD133/VEGFR-2/CD34,병파차방법명명위미공법.발현접충후제4천,현미경하가견명현적CFUs.면역형광감정대약7%적CFUs위CD133+/VEGFR-2+,진일보전대배양,류식세포술감정CD133+/VEGFR-2+/CD34+세포순도체70%이상.전대세포가재체외형성혈관양결구,병표체내피세포특이성표기물vWF.결과표명통과미공법능성공지종대서골수분리도EPCs.
