中草药
中草藥
중초약
CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
2008年
5期
718-723
,共6页
张文生%李锋%鲍军强%王胜春%尚刚伟%李军昌%王长海
張文生%李鋒%鮑軍彊%王勝春%尚剛偉%李軍昌%王長海
장문생%리봉%포군강%왕성춘%상강위%리군창%왕장해
大黄素%LoVo细胞系%水通道蛋白2
大黃素%LoVo細胞繫%水通道蛋白2
대황소%LoVo세포계%수통도단백2
目的 探讨大黄素对体外培养LoVo细胞水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)表达的调节效应.方法 体外培养LoVo细胞并予不同质量浓度大黄素含药培养液24 h处理及大黄素含药培养液(20 mg/L)不同时间处理,采用免疫细胞化学方法观察LoVo细胞AQP2蛋白表达位置并初步观察AQP2蛋白表达的变化趋势,采用Western blotting及半定量RT-PCR检测AQP2蛋白及mRNA的表达.结果 AQP2表达于LoVo细胞的细胞膜,且与大黄素用药浓度及用药时间存在着相关性.进一步的Western blotting证实,不同质量浓度大黄素含药培养液均可抑制AQP2蛋白的表达,药物质量浓度愈大,AQP2蛋白的表达愈低,其中大黄素20mg/L组及40mg/L组AQP2蛋白表达显著性降低;大黄素作用3、6 h组,AQP2蛋白表达上升,但与对照组比较,无显著差异;作用12、24、48 h组,AQP2蛋白表达呈进行性下降趋势.半定量RT-PCR结果显示,随着大黄素质量浓度的增加,AQP2 mRNA表达呈进行性下降趋势;在时间-效应方面,随着用药时间的延长,AQP2 mRNA表达呈进行性下降趋势.结论 大黄素可抑制LoVo细胞AQP2基因转录与翻译,这提示大黄素对AQP2表达的调节效应可能与大黄的泻下作用有关.
目的 探討大黃素對體外培養LoVo細胞水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)錶達的調節效應.方法 體外培養LoVo細胞併予不同質量濃度大黃素含藥培養液24 h處理及大黃素含藥培養液(20 mg/L)不同時間處理,採用免疫細胞化學方法觀察LoVo細胞AQP2蛋白錶達位置併初步觀察AQP2蛋白錶達的變化趨勢,採用Western blotting及半定量RT-PCR檢測AQP2蛋白及mRNA的錶達.結果 AQP2錶達于LoVo細胞的細胞膜,且與大黃素用藥濃度及用藥時間存在著相關性.進一步的Western blotting證實,不同質量濃度大黃素含藥培養液均可抑製AQP2蛋白的錶達,藥物質量濃度愈大,AQP2蛋白的錶達愈低,其中大黃素20mg/L組及40mg/L組AQP2蛋白錶達顯著性降低;大黃素作用3、6 h組,AQP2蛋白錶達上升,但與對照組比較,無顯著差異;作用12、24、48 h組,AQP2蛋白錶達呈進行性下降趨勢.半定量RT-PCR結果顯示,隨著大黃素質量濃度的增加,AQP2 mRNA錶達呈進行性下降趨勢;在時間-效應方麵,隨著用藥時間的延長,AQP2 mRNA錶達呈進行性下降趨勢.結論 大黃素可抑製LoVo細胞AQP2基因轉錄與翻譯,這提示大黃素對AQP2錶達的調節效應可能與大黃的瀉下作用有關.
목적 탐토대황소대체외배양LoVo세포수통도단백2(aquaporin 2,AQP2)표체적조절효응.방법 체외배양LoVo세포병여불동질량농도대황소함약배양액24 h처리급대황소함약배양액(20 mg/L)불동시간처리,채용면역세포화학방법관찰LoVo세포AQP2단백표체위치병초보관찰AQP2단백표체적변화추세,채용Western blotting급반정량RT-PCR검측AQP2단백급mRNA적표체.결과 AQP2표체우LoVo세포적세포막,차여대황소용약농도급용약시간존재착상관성.진일보적Western blotting증실,불동질량농도대황소함약배양액균가억제AQP2단백적표체,약물질량농도유대,AQP2단백적표체유저,기중대황소20mg/L조급40mg/L조AQP2단백표체현저성강저;대황소작용3、6 h조,AQP2단백표체상승,단여대조조비교,무현저차이;작용12、24、48 h조,AQP2단백표체정진행성하강추세.반정량RT-PCR결과현시,수착대황소질량농도적증가,AQP2 mRNA표체정진행성하강추세;재시간-효응방면,수착용약시간적연장,AQP2 mRNA표체정진행성하강추세.결론 대황소가억제LoVo세포AQP2기인전록여번역,저제시대황소대AQP2표체적조절효응가능여대황적사하작용유관.
