生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2009年
2期
133-136
,共4页
李慧%李威%王倩%宋和存%郭毅
李慧%李威%王倩%宋和存%郭毅
리혜%리위%왕천%송화존%곽의
人胚胎干细胞%慢病毒栽体%内部核糖体进入位点%裂解因子2A%甲基转移酶
人胚胎榦細胞%慢病毒栽體%內部覈糖體進入位點%裂解因子2A%甲基轉移酶
인배태간세포%만병독재체%내부핵당체진입위점%렬해인자2A%갑기전이매
人胚胎干细胞的基因修饰对于干细胞在体外的调控及促进干细胞在治疗方面的应用具有很高价值.探讨了以艾滋病病毒-1为基础的慢病毒栽体转导人胚胎干细胞,表达2种或3种转移基因的可行性和功效.应用脑心肌炎病毒的内部核糖体进入住点(IRFS)序列和/或口蹄疫病毒(FMDV)裂解因子2A构建双顺反子和三顺反子慢病毒载体,绿色荧光蛋白(eGFP)和O<'6>-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶作为检测基因.抗嘌呤基因(嘌呤-N-甲基转移酶;PAC)作为选择基因,转染人胚胎干细胞后经过嘌呤选择.通过流式细胞技术和蛋白印迹杂交方法检测eGFP和MGMT的表达.多基因慢病毒载体可以同时将2或3个基因转移到人胚胎干细胞.多顺反子慢病毒栽体转导人胚胎干细胞后经过嘌呤选择,可以使转移基因高效、均匀的表达,在人胚胎干细胞的基础和应用研究方面具有重要意义.
人胚胎榦細胞的基因脩飾對于榦細胞在體外的調控及促進榦細胞在治療方麵的應用具有很高價值.探討瞭以艾滋病病毒-1為基礎的慢病毒栽體轉導人胚胎榦細胞,錶達2種或3種轉移基因的可行性和功效.應用腦心肌炎病毒的內部覈糖體進入住點(IRFS)序列和/或口蹄疫病毒(FMDV)裂解因子2A構建雙順反子和三順反子慢病毒載體,綠色熒光蛋白(eGFP)和O<'6>-甲基鳥嘌呤-DNA-甲基轉移酶作為檢測基因.抗嘌呤基因(嘌呤-N-甲基轉移酶;PAC)作為選擇基因,轉染人胚胎榦細胞後經過嘌呤選擇.通過流式細胞技術和蛋白印跡雜交方法檢測eGFP和MGMT的錶達.多基因慢病毒載體可以同時將2或3箇基因轉移到人胚胎榦細胞.多順反子慢病毒栽體轉導人胚胎榦細胞後經過嘌呤選擇,可以使轉移基因高效、均勻的錶達,在人胚胎榦細胞的基礎和應用研究方麵具有重要意義.
인배태간세포적기인수식대우간세포재체외적조공급촉진간세포재치료방면적응용구유흔고개치.탐토료이애자병병독-1위기출적만병독재체전도인배태간세포,표체2충혹3충전이기인적가행성화공효.응용뇌심기염병독적내부핵당체진입주점(IRFS)서렬화/혹구제역병독(FMDV)렬해인자2A구건쌍순반자화삼순반자만병독재체,록색형광단백(eGFP)화O<'6>-갑기조표령-DNA-갑기전이매작위검측기인.항표령기인(표령-N-갑기전이매;PAC)작위선택기인,전염인배태간세포후경과표령선택.통과류식세포기술화단백인적잡교방법검측eGFP화MGMT적표체.다기인만병독재체가이동시장2혹3개기인전이도인배태간세포.다순반자만병독재체전도인배태간세포후경과표령선택,가이사전이기인고효、균균적표체,재인배태간세포적기출화응용연구방면구유중요의의.
