上海交通大学学报(医学版)
上海交通大學學報(醫學版)
상해교통대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2011年
7期
884-889
,共6页
糖皮质激素受体%皮质酮%Leydig细胞%凋亡
糖皮質激素受體%皮質酮%Leydig細胞%凋亡
당피질격소수체%피질동%Leydig세포%조망
目的 以小鼠Leydig肿瘤细胞(MLTC)为细胞模型,探讨细胞中糖皮质激素受体(GR)表达量改变与应激水平皮质酮(CORT)诱导的细胞凋亡的相关性.方法 GR过表达实验分为GR质粒组、空载质粒组和空白对照1组,采用基因克隆技术使GR质粒组MLTC中的GR呈过表达状态,Western blotting检测验证;GR低表达实验分为空白对照2组、脂质体对照组、GRsiRNA组和对照siRNA组,采用RNA干扰技术使GR siRNA组MLTC中的GR呈低表达状态,Western blotting检测验证.以应激水平的CORT(终浓度200 nmol/L)处理两种实验分组的MLTC(GR过表达+CORT组、空载质粒+CORT组、空白对照1组和GR低表达+CORT组、对照siRNA+CORT组、空白对照2组),分别以CORT处理的空白对照1、2组MLTC作为单纯CORT处理1,2组;流式细胞术检测各组MLTC细胞凋亡率,分析GR表达与细胞凋亡率的相关性.结果 GR过表达+CORT组、空载质粒+CORT组、单纯CORT处理1组和空白对照1组的细胞凋亡率分别为(36.6±0.6)%、(23.8±0.8)%、(24.3±0.6)%和(4.1±0.5)%,GR过表达+CORT组细胞凋亡率显著高于其他各组(P<0.01);GR低表达+CORT组、对照siRNA+CORT组、单纯CORT处理2组和空白对照2组的细胞凋亡率分别为(12.2±0.6)%、(22.5±0.6)%、(22.3±0.9)%和(4.1±0.5)%,;GR低表达+CORT组细胞凋亡率显著低于对照siRNA+CORT组和单纯CORT处理2组(P<0.01).MLTC中GR表达量与细胞凋亡率呈显著正相关(r=0.947,P<0.05).结论 Leydig细胞中GR表达量的改变与应激水平CORT诱导的细胞凋亡率改变呈显著正相关,由应激导致的Leydig细胞凋亡可能是糖皮质激素直接作用的结果.
目的 以小鼠Leydig腫瘤細胞(MLTC)為細胞模型,探討細胞中糖皮質激素受體(GR)錶達量改變與應激水平皮質酮(CORT)誘導的細胞凋亡的相關性.方法 GR過錶達實驗分為GR質粒組、空載質粒組和空白對照1組,採用基因剋隆技術使GR質粒組MLTC中的GR呈過錶達狀態,Western blotting檢測驗證;GR低錶達實驗分為空白對照2組、脂質體對照組、GRsiRNA組和對照siRNA組,採用RNA榦擾技術使GR siRNA組MLTC中的GR呈低錶達狀態,Western blotting檢測驗證.以應激水平的CORT(終濃度200 nmol/L)處理兩種實驗分組的MLTC(GR過錶達+CORT組、空載質粒+CORT組、空白對照1組和GR低錶達+CORT組、對照siRNA+CORT組、空白對照2組),分彆以CORT處理的空白對照1、2組MLTC作為單純CORT處理1,2組;流式細胞術檢測各組MLTC細胞凋亡率,分析GR錶達與細胞凋亡率的相關性.結果 GR過錶達+CORT組、空載質粒+CORT組、單純CORT處理1組和空白對照1組的細胞凋亡率分彆為(36.6±0.6)%、(23.8±0.8)%、(24.3±0.6)%和(4.1±0.5)%,GR過錶達+CORT組細胞凋亡率顯著高于其他各組(P<0.01);GR低錶達+CORT組、對照siRNA+CORT組、單純CORT處理2組和空白對照2組的細胞凋亡率分彆為(12.2±0.6)%、(22.5±0.6)%、(22.3±0.9)%和(4.1±0.5)%,;GR低錶達+CORT組細胞凋亡率顯著低于對照siRNA+CORT組和單純CORT處理2組(P<0.01).MLTC中GR錶達量與細胞凋亡率呈顯著正相關(r=0.947,P<0.05).結論 Leydig細胞中GR錶達量的改變與應激水平CORT誘導的細胞凋亡率改變呈顯著正相關,由應激導緻的Leydig細胞凋亡可能是糖皮質激素直接作用的結果.
목적 이소서Leydig종류세포(MLTC)위세포모형,탐토세포중당피질격소수체(GR)표체량개변여응격수평피질동(CORT)유도적세포조망적상관성.방법 GR과표체실험분위GR질립조、공재질립조화공백대조1조,채용기인극륭기술사GR질립조MLTC중적GR정과표체상태,Western blotting검측험증;GR저표체실험분위공백대조2조、지질체대조조、GRsiRNA조화대조siRNA조,채용RNA간우기술사GR siRNA조MLTC중적GR정저표체상태,Western blotting검측험증.이응격수평적CORT(종농도200 nmol/L)처리량충실험분조적MLTC(GR과표체+CORT조、공재질립+CORT조、공백대조1조화GR저표체+CORT조、대조siRNA+CORT조、공백대조2조),분별이CORT처리적공백대조1、2조MLTC작위단순CORT처리1,2조;류식세포술검측각조MLTC세포조망솔,분석GR표체여세포조망솔적상관성.결과 GR과표체+CORT조、공재질립+CORT조、단순CORT처리1조화공백대조1조적세포조망솔분별위(36.6±0.6)%、(23.8±0.8)%、(24.3±0.6)%화(4.1±0.5)%,GR과표체+CORT조세포조망솔현저고우기타각조(P<0.01);GR저표체+CORT조、대조siRNA+CORT조、단순CORT처리2조화공백대조2조적세포조망솔분별위(12.2±0.6)%、(22.5±0.6)%、(22.3±0.9)%화(4.1±0.5)%,;GR저표체+CORT조세포조망솔현저저우대조siRNA+CORT조화단순CORT처리2조(P<0.01).MLTC중GR표체량여세포조망솔정현저정상관(r=0.947,P<0.05).결론 Leydig세포중GR표체량적개변여응격수평CORT유도적세포조망솔개변정현저정상관,유응격도치적Leydig세포조망가능시당피질격소직접작용적결과.