CAJ | 학술논문

探讨一种用于乙型肝炎病毒(HBV)基因组扩增的灵敏度高、广谱性好的巢式聚合酶链式反应(nested PCR)方法,适用于较低病毒拷贝数标本的HBV DNA扩增.通过设计两套通用巢式引物,实现对各基因型(A,B,C,D,E,G)HBV均具有较高的扩增效率；采用两步法分段扩增HBV基因组,对两段目的产物进行测序拼接获得HBV的全基因序列.应用本方法对4组病毒拷贝量(IU/mL)分别为:＞1.0×104,1.0×103～1.0×104,2.0×102～1.0×103,＜2.0×102的100份血清标本进行全长基冈组扩增,其中75份获得阳性结果,各组阳性率依次为:100％,66.7％,60％,25％,有效扩增灵敏度为2.0×102～1.0×103 IU/mL;而一步法只在病毒拷贝量＞1.0×104 1U/mL的标本组中获得15份阳性结果,总的阳性率仅为15％,说明该方法扩增灵敏度明显高于一步法.因此,本方法为HBV流行病学调查研究HBV基因组序列提供了更高的灵敏度,可在流行病学调查中发挥重要作用.
탐토일충용우을형간염병독(HBV)기인조확증적령민도고、엄보성호적소식취합매련식반응(nested PCR)방법,괄용우교저병독고패수표본적HBV DNA확증.통과설계량투통용소식인물,실현대각기인형(A,B,C,D,E,G)HBV균구유교고적확증효솔；채용량보법분단확증HBV기인조,대량단목적산물진행측서병접획득HBV적전기인서렬.응용본방법대4조병독고패량(IU/mL)분별위:＞1.0×104,1.0×103～1.0×104,2.0×102～1.0×103,＜2.0×102적100빈혈청표본진행전장기강조확증,기중75빈획득양성결과,각조양성솔의차위:100％,66.7％,60％,25％,유효확증령민도위2.0×102～1.0×103 IU/mL;이일보법지재병독고패량＞1.0×104 1U/mL적표본조중획득15빈양성결과,총적양성솔부위15％,설명해방법확증령민도명현고우일보법.인차,본방법위HBV류행병학조사연구HBV기인조서렬제공료경고적령민도,가재류행병학조사중발휘중요작용.