浙江理工大学学报
浙江理工大學學報
절강리공대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG SCI-TECH UNIVERSITY
2012年
1期
119-124
,共6页
雷文%王世兵%马步云%叶静%夏玉龙%王毅刚
雷文%王世兵%馬步雲%葉靜%夏玉龍%王毅剛
뢰문%왕세병%마보운%협정%하옥룡%왕의강
AFP%CEA%双荧光素酶报告基因%转录靶向性
AFP%CEA%雙熒光素酶報告基因%轉錄靶嚮性
AFP%CEA%쌍형광소매보고기인%전록파향성
为了研究AFP和CEA基因启动子的转录活性与肿瘤特异性,本实验利用PCR技术扩增AFP和CEA基因上游序列,并将其克隆到pGL3-Basic载体中构建pGL3-AFP和pGL3 -CEA荧光报告质粒.将构建的pGL3-AFP和pGL3-CEA质粒分别与pRL-TK共转染人结肠癌细胞株SW620、肝癌细胞株Huh-7、肺癌细胞株A549、宫颈癌细胞株Hela、人肝正常细胞株QSG-7701、人肺正常细胞株Beas-2b,用双荧光报告系统检测这两种质粒在不同细胞里的荧光活性表达.酶切和测序结果证实成功构建了双荧光素酶报告质粒pGL3-AFP和pGL3-CEA,双荧光素酶报告基因检测结果证明AFP和CEA均具有一定的肿瘤特异性.这些结果表明AFP和CEA均具有一定的肿瘤特异性,为进一步研究AFP和CEA基因的表达调控机制和探讨靶向基因-病毒治疗提供依据.
為瞭研究AFP和CEA基因啟動子的轉錄活性與腫瘤特異性,本實驗利用PCR技術擴增AFP和CEA基因上遊序列,併將其剋隆到pGL3-Basic載體中構建pGL3-AFP和pGL3 -CEA熒光報告質粒.將構建的pGL3-AFP和pGL3-CEA質粒分彆與pRL-TK共轉染人結腸癌細胞株SW620、肝癌細胞株Huh-7、肺癌細胞株A549、宮頸癌細胞株Hela、人肝正常細胞株QSG-7701、人肺正常細胞株Beas-2b,用雙熒光報告繫統檢測這兩種質粒在不同細胞裏的熒光活性錶達.酶切和測序結果證實成功構建瞭雙熒光素酶報告質粒pGL3-AFP和pGL3-CEA,雙熒光素酶報告基因檢測結果證明AFP和CEA均具有一定的腫瘤特異性.這些結果錶明AFP和CEA均具有一定的腫瘤特異性,為進一步研究AFP和CEA基因的錶達調控機製和探討靶嚮基因-病毒治療提供依據.
위료연구AFP화CEA기인계동자적전록활성여종류특이성,본실험이용PCR기술확증AFP화CEA기인상유서렬,병장기극륭도pGL3-Basic재체중구건pGL3-AFP화pGL3 -CEA형광보고질립.장구건적pGL3-AFP화pGL3-CEA질립분별여pRL-TK공전염인결장암세포주SW620、간암세포주Huh-7、폐암세포주A549、궁경암세포주Hela、인간정상세포주QSG-7701、인폐정상세포주Beas-2b,용쌍형광보고계통검측저량충질립재불동세포리적형광활성표체.매절화측서결과증실성공구건료쌍형광소매보고질립pGL3-AFP화pGL3-CEA,쌍형광소매보고기인검측결과증명AFP화CEA균구유일정적종류특이성.저사결과표명AFP화CEA균구유일정적종류특이성,위진일보연구AFP화CEA기인적표체조공궤제화탐토파향기인-병독치료제공의거.
