一个用于转染细胞分选的双顺反子载体的构建及其应用
일개용우전염세포분선적쌍순반자재체적구건급기응용
A Bicistronic Expression Vector for The Selection of Transfected Cells
  • 万方数据
    生物化学与生物物理进展 생물화학여생물물리진전
    PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
    2005年 9期 889-894 ,共6页

    曲笑霞%秦立蓬%岳文%高艳红%李艳华%袁红丰%王韫芳%刘大庆%闫舫%施双双%裴雪涛

    곡소하%진립봉%악문%고염홍%리염화%원홍봉%왕운방%류대경%염방%시쌍쌍%배설도

    载体%转染细胞%分选%CD34 載體%轉染細胞%分選%CD34
    재체%전염세포%분선%CD34
    为简化转染细胞的分选过程,构建了一个含有细胞表面标志CD34基因的双顺反子载体p3.1-IRES-CD34.利用来源于脑心肌炎病毒(EMCV)的内部核糖体进入位点(IRES),实现目的基因与CD34基因的共同表达.将绿色荧光蛋白(EGFP)作为目的基因插入载体的多克隆位点,然后转染NIH-3T3细胞,通过免疫磁珠分选(MACS)方法来分选细胞.结果表明:对于转染细胞,均可实现快速分选(瞬时转染细胞约48 h,稳定转染10～15天),并且获得较高纯度(95%以上)的表达目的基因细胞.
    위간화전염세포적분선과정,구건료일개함유세포표면표지CD34기인적쌍순반자재체p3.1-IRES-CD34.이용래원우뇌심기염병독(EMCV)적내부핵당체진입위점(IRES),실현목적기인여CD34기인적공동표체.장록색형광단백(EGFP)작위목적기인삽입재체적다극륭위점,연후전염NIH-3T3세포,통과면역자주분선(MACS)방법래분선세포.결과표명:대우전염세포,균가실현쾌속분선(순시전염세포약48 h,은정전염10～15천),병차획득교고순도(95%이상)적표체목적기인세포.
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