医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2006年
8期
678-681
,共4页
Eotaxin%逆转录聚合酶链反应%序列分析
Eotaxin%逆轉錄聚閤酶鏈反應%序列分析
Eotaxin%역전록취합매련반응%서렬분석
目的:获得人嗜酸性粒细胞趋化因子Eotaxin 基因,构建其原核表达载体,并初步表达成熟的Eotaxin,为进一步构建其N-端突变体,检测其生物学活性作准备.方法: 提取外周血单个核细胞细胞总RNA ,经RT-PCR 扩增编码人Eotaxin全长cDNA 序列,并将其克隆至T载体进行序列测定,然后构建于原核表达载体PET30a+中,并转入大肠杆菌表达.结果: RT-PCR 扩增得到了400 bp左右的DNA 片段,序列分析发现其中包含了GenBank中报道的编码Eotaxin cDNA 序列,并获得了正确表达.结论: Eotaxin cDNA 的克隆及其原核表达载体的构建及表达,为进一步构建其N-端突变体,纯化和检测其生物学活性奠定了基础.
目的:穫得人嗜痠性粒細胞趨化因子Eotaxin 基因,構建其原覈錶達載體,併初步錶達成熟的Eotaxin,為進一步構建其N-耑突變體,檢測其生物學活性作準備.方法: 提取外週血單箇覈細胞細胞總RNA ,經RT-PCR 擴增編碼人Eotaxin全長cDNA 序列,併將其剋隆至T載體進行序列測定,然後構建于原覈錶達載體PET30a+中,併轉入大腸桿菌錶達.結果: RT-PCR 擴增得到瞭400 bp左右的DNA 片段,序列分析髮現其中包含瞭GenBank中報道的編碼Eotaxin cDNA 序列,併穫得瞭正確錶達.結論: Eotaxin cDNA 的剋隆及其原覈錶達載體的構建及錶達,為進一步構建其N-耑突變體,純化和檢測其生物學活性奠定瞭基礎.
목적:획득인기산성립세포추화인자Eotaxin 기인,구건기원핵표체재체,병초보표체성숙적Eotaxin,위진일보구건기N-단돌변체,검측기생물학활성작준비.방법: 제취외주혈단개핵세포세포총RNA ,경RT-PCR 확증편마인Eotaxin전장cDNA 서렬,병장기극륭지T재체진행서렬측정,연후구건우원핵표체재체PET30a+중,병전입대장간균표체.결과: RT-PCR 확증득도료400 bp좌우적DNA 편단,서렬분석발현기중포함료GenBank중보도적편마Eotaxin cDNA 서렬,병획득료정학표체.결론: Eotaxin cDNA 적극륭급기원핵표체재체적구건급표체,위진일보구건기N-단돌변체,순화화검측기생물학활성전정료기출.
