肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2007年
8期
615-619
,共5页
刘黎明%陈昌杰%陈正徐%胡博%段光军%胡华成
劉黎明%陳昌傑%陳正徐%鬍博%段光軍%鬍華成
류려명%진창걸%진정서%호박%단광군%호화성
细胞系,肿瘤%RNA干扰%细胞凋亡%Fas配体蛋白
細胞繫,腫瘤%RNA榦擾%細胞凋亡%Fas配體蛋白
세포계,종류%RNA간우%세포조망%Fas배체단백
目的:探讨可溶性FasL(sFasL)联合survivin RNA干扰对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响.方法:构建survivin特异RNA小干扰表达载体,DNA测序,转染A549细胞.G418(geneticin)筛选稳定表达survivin RNA小干扰细胞株,荧光实时定量RT-PCR、免疫印迹 (Western blot)和免疫组化法检测survivin mRNA和蛋白表达.sFasL作用于转染后细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测细胞活性和凋亡率.结果:成功构建survivin-siRNA表达载体,筛选出稳定表达单克隆细胞.Survivin mRNA和蛋白表达分别下降76.4%(P＜0.01)和84.5%,免疫组化也显示survivin下调.sFasL联合survivin RNA干扰细胞,光密度值在各时间点较siRNA组、sFasL组和对照组均明显降低(P＜0.01),抑制率增加;凋亡率较siRNA组、sFasL组和对照组明显增加(P＜0.01).结论:Survivin RNA干扰表达载体可降低survivin的表达.sFasL 联合survivin RNA干扰较单用sFasL或survivin RNA干扰能更有效地抑制肺腺癌细胞A549增殖,促进凋亡.
目的:探討可溶性FasL(sFasL)聯閤survivin RNA榦擾對肺腺癌細胞A549增殖和凋亡的影響.方法:構建survivin特異RNA小榦擾錶達載體,DNA測序,轉染A549細胞.G418(geneticin)篩選穩定錶達survivin RNA小榦擾細胞株,熒光實時定量RT-PCR、免疫印跡 (Western blot)和免疫組化法檢測survivin mRNA和蛋白錶達.sFasL作用于轉染後細胞,四甲基偶氮唑藍(MTT)法和流式細胞儀檢測細胞活性和凋亡率.結果:成功構建survivin-siRNA錶達載體,篩選齣穩定錶達單剋隆細胞.Survivin mRNA和蛋白錶達分彆下降76.4%(P＜0.01)和84.5%,免疫組化也顯示survivin下調.sFasL聯閤survivin RNA榦擾細胞,光密度值在各時間點較siRNA組、sFasL組和對照組均明顯降低(P＜0.01),抑製率增加;凋亡率較siRNA組、sFasL組和對照組明顯增加(P＜0.01).結論:Survivin RNA榦擾錶達載體可降低survivin的錶達.sFasL 聯閤survivin RNA榦擾較單用sFasL或survivin RNA榦擾能更有效地抑製肺腺癌細胞A549增殖,促進凋亡.
목적:탐토가용성FasL(sFasL)연합survivin RNA간우대폐선암세포A549증식화조망적영향.방법:구건survivin특이RNA소간우표체재체,DNA측서,전염A549세포.G418(geneticin)사선은정표체survivin RNA소간우세포주,형광실시정량RT-PCR、면역인적 (Western blot)화면역조화법검측survivin mRNA화단백표체.sFasL작용우전염후세포,사갑기우담서람(MTT)법화류식세포의검측세포활성화조망솔.결과:성공구건survivin-siRNA표체재체,사선출은정표체단극륭세포.Survivin mRNA화단백표체분별하강76.4%(P＜0.01)화84.5%,면역조화야현시survivin하조.sFasL연합survivin RNA간우세포,광밀도치재각시간점교siRNA조、sFasL조화대조조균명현강저(P＜0.01),억제솔증가;조망솔교siRNA조、sFasL조화대조조명현증가(P＜0.01).결론:Survivin RNA간우표체재체가강저survivin적표체.sFasL 연합survivin RNA간우교단용sFasL혹survivin RNA간우능경유효지억제폐선암세포A549증식,촉진조망.
