CAJ | 학술논문

目的:研究免疫磁珠法和贴壁换液法分离骨髓内皮祖细胞的可行性和条件,并比较两种方法优缺点.方法:利用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取内皮祖细胞,体外观察细胞生长及形态变化,通过检测细胞血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)、Ⅷ因子相关抗原抗体表达、摄取乙酰化-低密度脂蛋白(Ac-LDL)情况和超微结构等进行鉴定.同时,流式细胞检测分离所得细胞的纯度、细胞计数测定分离所得细胞的数量及MTT法检测细胞生长增殖状况等,对两种分离方法进行对比研究.结果:用免疫磁珠法和贴壁换液法从骨髓中分别提取的细胞,体外培养后细胞呈铺路石形,透射电镜显示细胞内具有特征性的W-P小体,免疫荧光染色检测细胞相关抗原VEGFR-2, Ⅷ/vWF 呈阳性,同时细胞摄取Ac-LDL,证实为内皮祖细胞.免疫磁珠法与贴壁换液法相比,分离所得内皮祖细胞数量是后者2倍,纯度为76%,明显高于贴壁换液法的29%;同时,两者对细胞增殖生长无明显影响.结论:利用免疫磁珠法和贴壁换液法均可分离得到骨髓内皮祖细胞,它将成为新的组织工程种子细胞.免疫磁珠法分离得到细胞纯度更高、数量更大,但步骤复杂、价格昂贵;贴壁换液法得到细胞纯度和数量偏低,但方法简单、经济、实用性强.
목적:연구면역자주법화첩벽환액법분리골수내피조세포적가행성화조건,병비교량충방법우결점.방법:이용면역자주법화첩벽환액법종골수중분별제취내피조세포,체외관찰세포생장급형태변화,통과검측세포혈관내피생장인자수체-2(VEGFR-2)、Ⅷ인자상관항원항체표체、섭취을선화-저밀도지단백(Ac-LDL)정황화초미결구등진행감정.동시,류식세포검측분리소득세포적순도、세포계수측정분리소득세포적수량급MTT법검측세포생장증식상황등,대량충분리방법진행대비연구.결과:용면역자주법화첩벽환액법종골수중분별제취적세포,체외배양후세포정포로석형,투사전경현시세포내구유특정성적W-P소체,면역형광염색검측세포상관항원VEGFR-2, Ⅷ/vWF 정양성,동시세포섭취Ac-LDL,증실위내피조세포.면역자주법여첩벽환액법상비,분리소득내피조세포수량시후자2배,순도위76%,명현고우첩벽환액법적29%;동시,량자대세포증식생장무명현영향.결론:이용면역자주법화첩벽환액법균가분리득도골수내피조세포,타장성위신적조직공정충자세포.면역자주법분리득도세포순도경고、수량경대,단보취복잡、개격앙귀;첩벽환액법득도세포순도화수량편저,단방법간단、경제、실용성강.