安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2011年
4期
310-313
,共4页
汤立宣%王治东%许望翔%葛常辉%杨晓明
湯立宣%王治東%許望翔%葛常輝%楊曉明
탕립선%왕치동%허망상%갈상휘%양효명
荧光素酶类%NF-κB%潮霉素B
熒光素酶類%NF-κB%潮黴素B
형광소매류%NF-κB%조매소B
目的 建立表达NF-κB-RE-luc2P荧光素酶报告基因的稳定细胞系以检测CBLB502的活性.方法 利用脂质体转染试剂Lipofectin2000将含有NF-κB报告基因的质粒NF-κB-RE-luc2P转染入人胚肾细胞(HEK293细胞),并通过潮霉素B进行克隆筛选,最后挑取单克隆进行放大并应用荧光素酶检测方法进行鉴定.结果 经200 μg/ml的潮霉素B筛选,得到所需要的单克隆株,鉴定并保存.应用该潮霉素抗性单克隆细胞系对基于NF-κB信号通路的新型抗辐射蛋白药物CBLB502活性的检测显示出良好的量效关系.结论 本实验通过Lipofectin2000转染法并在潮霉B筛选成功培育出稳定表达NF-κB报告基因活性的HEK293细胞系.
目的 建立錶達NF-κB-RE-luc2P熒光素酶報告基因的穩定細胞繫以檢測CBLB502的活性.方法 利用脂質體轉染試劑Lipofectin2000將含有NF-κB報告基因的質粒NF-κB-RE-luc2P轉染入人胚腎細胞(HEK293細胞),併通過潮黴素B進行剋隆篩選,最後挑取單剋隆進行放大併應用熒光素酶檢測方法進行鑒定.結果 經200 μg/ml的潮黴素B篩選,得到所需要的單剋隆株,鑒定併保存.應用該潮黴素抗性單剋隆細胞繫對基于NF-κB信號通路的新型抗輻射蛋白藥物CBLB502活性的檢測顯示齣良好的量效關繫.結論 本實驗通過Lipofectin2000轉染法併在潮黴B篩選成功培育齣穩定錶達NF-κB報告基因活性的HEK293細胞繫.
목적 건립표체NF-κB-RE-luc2P형광소매보고기인적은정세포계이검측CBLB502적활성.방법 이용지질체전염시제Lipofectin2000장함유NF-κB보고기인적질립NF-κB-RE-luc2P전염입인배신세포(HEK293세포),병통과조매소B진행극륭사선,최후도취단극륭진행방대병응용형광소매검측방법진행감정.결과 경200 μg/ml적조매소B사선,득도소수요적단극륭주,감정병보존.응용해조매소항성단극륭세포계대기우NF-κB신호통로적신형항복사단백약물CBLB502활성적검측현시출량호적량효관계.결론 본실험통과Lipofectin2000전염법병재조매B사선성공배육출은정표체NF-κB보고기인활성적HEK293세포계.
