CAJ | 학술논문

应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取百山祖冷杉Abies beshanzuensis叶片DNA.建立百山祖冷杉简单重复序列(SSR)反应体系.在体系建立过程中,采用单因素法分剐对影响聚合酶链反应(PCR)的因素进行分析.结果表明:在20.00μL反应体系中,模板DNA用量、镁离子(Mg2+)浓度、三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别是60 ng,3.75 mmol·L-1,0.15 mmol·L-1,0.40 μmol·L-1,16.67 nkat(1.0 U)时结果最好.随机挑取其中1时引物扩增的多态性片段进行克隆测序,序列经比对后得到的一致性值达到94%,表明其他杉科植物的SSR引物可以在百山祖冷杉中应用.通过引物筛选,得到15对引物可在百山祖冷杉中扩增得到多态性务带,其中4对引物扩增得到的部分片段在百山祖冷杉和日本冷杉Abies firma间有明显区别.这些结果表明,利用SSR分子标记技术能够用于百山祖冷杉人工辅助授粉子代的初步鉴定.
응용십륙완기삼갑기추화안(CTAB)법제취백산조랭삼Abies beshanzuensis협편DNA.건립백산조랭삼간단중복서렬(SSR)반응체계.재체계건립과정중,채용단인소법분과대영향취합매련반응(PCR)적인소진행분석.결과표명:재20.00μL반응체계중,모판DNA용량、미리자(Mg2+)농도、삼린산조표령탈양핵감산(dNTPs)농도、인물농도、Taq DNA취합매용량분별시60 ng,3.75 mmol·L-1,0.15 mmol·L-1,0.40 μmol·L-1,16.67 nkat(1.0 U)시결과최호.수궤도취기중1시인물확증적다태성편단진행극륭측서,서렬경비대후득도적일치성치체도94%,표명기타삼과식물적SSR인물가이재백산조랭삼중응용.통과인물사선,득도15대인물가재백산조랭삼중확증득도다태성무대,기중4대인물확증득도적부분편단재백산조랭삼화일본랭삼Abies firma간유명현구별.저사결과표명,이용SSR분자표기기술능구용우백산조랭삼인공보조수분자대적초보감정.