中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2011年
11期
873-876
,共4页
蔺文成%王晓玲%刘芹防%崔尚金
藺文成%王曉玲%劉芹防%崔尚金
린문성%왕효령%류근방%최상금
Ⅰ型干扰素%JAK-STAT%荧光定量PCR%检测
Ⅰ型榦擾素%JAK-STAT%熒光定量PCR%檢測
Ⅰ형간우소%JAK-STAT%형광정량PCR%검측
为建立定量检测猪Janus激酶(JAK)和信号转导和转录激活因子(STAT) mRNA的TaqMan荧光定量PCR检测方法,本研究针对猪JAK-1,JAK-2,STAT-1、STAT-2及管家基因β-actin的序列设计了特异性的引物和探针,分别构建了各自的阳性重组质粒,建立了TaqMan荧光定量PCR方法.结果表明:所建立的检测方法荧光定量PCR扩增均无非特异性产物的产生；检测下限均达1.0×101 copies/μL;批内及批间变异系数均小于2％.利用该方法对猪细小病毒(PPV)感染ST细胞48 h后JAK-1、JAK-2、STAT-1和STAT-2 mRNA的转录水平进行了检测,结果表明:JAK-1和JAK-2转录水平显著上调,STAT-1和STAT-2转录水平呈现下调趋势,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,适于猪细胞传导因子JAK和STAT的定量检测.
為建立定量檢測豬Janus激酶(JAK)和信號轉導和轉錄激活因子(STAT) mRNA的TaqMan熒光定量PCR檢測方法,本研究針對豬JAK-1,JAK-2,STAT-1、STAT-2及管傢基因β-actin的序列設計瞭特異性的引物和探針,分彆構建瞭各自的暘性重組質粒,建立瞭TaqMan熒光定量PCR方法.結果錶明:所建立的檢測方法熒光定量PCR擴增均無非特異性產物的產生；檢測下限均達1.0×101 copies/μL;批內及批間變異繫數均小于2％.利用該方法對豬細小病毒(PPV)感染ST細胞48 h後JAK-1、JAK-2、STAT-1和STAT-2 mRNA的轉錄水平進行瞭檢測,結果錶明:JAK-1和JAK-2轉錄水平顯著上調,STAT-1和STAT-2轉錄水平呈現下調趨勢,本研究建立的TaqMan熒光定量PCR方法特異性彊、敏感性高、重複性好,適于豬細胞傳導因子JAK和STAT的定量檢測.
위건립정량검측저Janus격매(JAK)화신호전도화전록격활인자(STAT) mRNA적TaqMan형광정량PCR검측방법,본연구침대저JAK-1,JAK-2,STAT-1、STAT-2급관가기인β-actin적서렬설계료특이성적인물화탐침,분별구건료각자적양성중조질립,건립료TaqMan형광정량PCR방법.결과표명:소건립적검측방법형광정량PCR확증균무비특이성산물적산생；검측하한균체1.0×101 copies/μL;비내급비간변이계수균소우2％.이용해방법대저세소병독(PPV)감염ST세포48 h후JAK-1、JAK-2、STAT-1화STAT-2 mRNA적전록수평진행료검측,결과표명:JAK-1화JAK-2전록수평현저상조,STAT-1화STAT-2전록수평정현하조추세,본연구건립적TaqMan형광정량PCR방법특이성강、민감성고、중복성호,괄우저세포전도인자JAK화STAT적정량검측.
