CAJ | 학술논문

目的探讨pcDNA3.1-oipA DNA疫苗在抗螺旋形与球形幽门螺杆菌(Hp)感染中的作用及其机制.方法抽提并纯化可表达OipA蛋白的重组质粒pcDNA3.1-oipA,以金粉包裹后,用基因枪接种BALB/c小鼠,5 μg/只,接种2次,以pcDNA3.1(空载组)作对照.对免疫小鼠进行:(1)免疫保护实验:于末次免疫后8周,分别给予螺旋形及球形Hp SS1攻击4次,于末次攻击4周后取胃组织做细菌学(组织尿素酶试验、细菌培养)及病理学检测.(2)小鼠免疫指标检测:分别于末次免疫后2、8、12周采集小鼠血清,用ELISA法检测其抗Hp OipA IgA、IgG、IgG1抗体.于末次免疫后12周,取脾细胞,用FLISA法检测IFN-γ、IL-2的含量;用流式细胞术检测CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值.结果以螺旋形及球形Hp攻击的免疫小鼠,快速尿素酶实验阳性率分别为20%和10%;细菌培养阳性率分别为60%和50%,与空载组比较P＜0.05.空载组小鼠胃黏膜均出现轻度或重度糜烂,而以螺旋形Hp攻击的实验组小鼠50%胃黏膜正常,以球形Hp攻击的实验组小鼠60%胃黏膜正常,与空载组比较P＜0.05.小鼠免疫指标检测结果:免疫后8周,产生了抗OipA的特异性IgA、IgG、IgG1抗体,抗体滴度比对照组高2倍以上;脾细胞中CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值升高;脾细胞培养上清液IFN-γ、IL-2的含量明显高于对照组(P＜0.05).结论 pcDNA3.1-oipA DNA疫苗能有效诱导免疫小鼠产生体液与细胞免疫并使小鼠兼具一定的抗螺旋形及球形Hp感染的能力.
목적탐토pcDNA3.1-oipA DNA역묘재항라선형여구형유문라간균(Hp)감염중적작용급기궤제.방법추제병순화가표체OipA단백적중조질립pcDNA3.1-oipA,이금분포과후,용기인창접충BALB/c소서,5 μg/지,접충2차,이pcDNA3.1(공재조)작대조.대면역소서진행:(1)면역보호실험:우말차면역후8주,분별급여라선형급구형Hp SS1공격4차,우말차공격4주후취위조직주세균학(조직뇨소매시험、세균배양)급병이학검측.(2)소서면역지표검측:분별우말차면역후2、8、12주채집소서혈청,용ELISA법검측기항Hp OipA IgA、IgG、IgG1항체.우말차면역후12주,취비세포,용FLISA법검측IFN-γ、IL-2적함량;용류식세포술검측CD4+/CD8+T림파세포적비치.결과이라선형급구형Hp공격적면역소서,쾌속뇨소매실험양성솔분별위20%화10%;세균배양양성솔분별위60%화50%,여공재조비교P＜0.05.공재조소서위점막균출현경도혹중도미란,이이라선형Hp공격적실험조소서50%위점막정상,이구형Hp공격적실험조소서60%위점막정상,여공재조비교P＜0.05.소서면역지표검측결과:면역후8주,산생료항OipA적특이성IgA、IgG、IgG1항체,항체적도비대조조고2배이상;비세포중CD4+/CD8+T림파세포적비치승고;비세포배양상청액IFN-γ、IL-2적함량명현고우대조조(P＜0.05).결론 pcDNA3.1-oipA DNA역묘능유효유도면역소서산생체액여세포면역병사소서겸구일정적항라선형급구형Hp감염적능력.