中华肾脏病杂志
中華腎髒病雜誌
중화신장병잡지
2002年
2期
103-106
,共4页
史伟%梁馨苓%刘双信%余细勇%梁永正%郝文科%杨周灼
史偉%樑馨苓%劉雙信%餘細勇%樑永正%郝文科%楊週灼
사위%량형령%류쌍신%여세용%량영정%학문과%양주작
细胞外基质%转化生长因子β1%反义RNA%基因治疗%系膜细胞
細胞外基質%轉化生長因子β1%反義RNA%基因治療%繫膜細胞
세포외기질%전화생장인자β1%반의RNA%기인치료%계막세포
目的观察转化生长因子beta 1(TGF-β1)反义RNA对系膜细胞基质合成的影响.方法构建含TGF-β1反义RNA的重组腺病毒,将重组腺病毒转染系膜细胞,用Northern blot检测转染系膜细胞TGF-β1及ColⅣmRNA的含量,用免疫组化半定量分析转染的系膜细胞中TGF-β1、纤连蛋白(FN)及胶原(Col)Ⅳ蛋白水平,并与无转染的系膜细胞对照组比较其表达的变化.结果构建了含TGF-β1反义RNA的重组腺病毒.重组反义TGF-β1腺病毒转染系膜细胞后,与对照组相比,在第24hTGF-β1及ColⅣ的mRNA无明显抑制,在48 h TGF-β1及ColⅣmRNA抑制率分别为22.5%,18.2%;72 h TGF-β1及ColⅣmRNA抑制率分别为29.5%,27.3%.免疫组织化学半定量结果显示:与对照组相比,在48 h始转染系膜细胞TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白含量开始下降,48 h TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白抑制率分别为16.5%,18.2%及14.6%;72 h TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白抑制率分别为23.5%,27.3%及26.8%.结论重组反义TGF-β1可抑制系膜细胞合成细胞外基质,在肾小球肾炎及肾小球硬化的研究及治疗中有潜在的应用价值.
目的觀察轉化生長因子beta 1(TGF-β1)反義RNA對繫膜細胞基質閤成的影響.方法構建含TGF-β1反義RNA的重組腺病毒,將重組腺病毒轉染繫膜細胞,用Northern blot檢測轉染繫膜細胞TGF-β1及ColⅣmRNA的含量,用免疫組化半定量分析轉染的繫膜細胞中TGF-β1、纖連蛋白(FN)及膠原(Col)Ⅳ蛋白水平,併與無轉染的繫膜細胞對照組比較其錶達的變化.結果構建瞭含TGF-β1反義RNA的重組腺病毒.重組反義TGF-β1腺病毒轉染繫膜細胞後,與對照組相比,在第24hTGF-β1及ColⅣ的mRNA無明顯抑製,在48 h TGF-β1及ColⅣmRNA抑製率分彆為22.5%,18.2%;72 h TGF-β1及ColⅣmRNA抑製率分彆為29.5%,27.3%.免疫組織化學半定量結果顯示:與對照組相比,在48 h始轉染繫膜細胞TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白含量開始下降,48 h TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白抑製率分彆為16.5%,18.2%及14.6%;72 h TGF-β1、FN及ColⅣ蛋白抑製率分彆為23.5%,27.3%及26.8%.結論重組反義TGF-β1可抑製繫膜細胞閤成細胞外基質,在腎小毬腎炎及腎小毬硬化的研究及治療中有潛在的應用價值.
목적관찰전화생장인자beta 1(TGF-β1)반의RNA대계막세포기질합성적영향.방법구건함TGF-β1반의RNA적중조선병독,장중조선병독전염계막세포,용Northern blot검측전염계막세포TGF-β1급ColⅣmRNA적함량,용면역조화반정량분석전염적계막세포중TGF-β1、섬련단백(FN)급효원(Col)Ⅳ단백수평,병여무전염적계막세포대조조비교기표체적변화.결과구건료함TGF-β1반의RNA적중조선병독.중조반의TGF-β1선병독전염계막세포후,여대조조상비,재제24hTGF-β1급ColⅣ적mRNA무명현억제,재48 h TGF-β1급ColⅣmRNA억제솔분별위22.5%,18.2%;72 h TGF-β1급ColⅣmRNA억제솔분별위29.5%,27.3%.면역조직화학반정량결과현시:여대조조상비,재48 h시전염계막세포TGF-β1、FN급ColⅣ단백함량개시하강,48 h TGF-β1、FN급ColⅣ단백억제솔분별위16.5%,18.2%급14.6%;72 h TGF-β1、FN급ColⅣ단백억제솔분별위23.5%,27.3%급26.8%.결론중조반의TGF-β1가억제계막세포합성세포외기질,재신소구신염급신소구경화적연구급치료중유잠재적응용개치.
