中华普通外科杂志
中華普通外科雜誌
중화보통외과잡지
CHINESE JOURNAL OF GENERAL SURGERY
2001年
5期
306-308
,共3页
杨庆%杨广顺%卫立辛%覃林花%贾凤歧%吴孟超%郭亚军
楊慶%楊廣順%衛立辛%覃林花%賈鳳歧%吳孟超%郭亞軍
양경%양엄순%위립신%담림화%가봉기%오맹초%곽아군
配体%杂合子%序列同源性%细菌
配體%雜閤子%序列同源性%細菌
배체%잡합자%서렬동원성%세균
目的构建携带小鼠Flt3配体(murine flt3 ligand,mFL)的重组腺病毒载体并检测它在感染后的小鼠肝癌细胞中的表达,为肝癌基因治疗提供实验基础。方法 PCR扩增含有mFL的质粒,应用高效细菌内同源重组系统构建携带mFL的重组腺病毒,感染小鼠肝癌细胞株Hepa1-6,一步法提取细胞总RNA,RT-PCR检测mFL的表达。结果构建了携带mFL的重组腺病毒,并在感染后的Hepa1-6细胞中检测到了mFL的mRNA。结论应用该细菌重组系统成功地构建了携带mFL的重组腺病毒载体,为下一步的基因治疗研究奠定了基础。
目的構建攜帶小鼠Flt3配體(murine flt3 ligand,mFL)的重組腺病毒載體併檢測它在感染後的小鼠肝癌細胞中的錶達,為肝癌基因治療提供實驗基礎。方法 PCR擴增含有mFL的質粒,應用高效細菌內同源重組繫統構建攜帶mFL的重組腺病毒,感染小鼠肝癌細胞株Hepa1-6,一步法提取細胞總RNA,RT-PCR檢測mFL的錶達。結果構建瞭攜帶mFL的重組腺病毒,併在感染後的Hepa1-6細胞中檢測到瞭mFL的mRNA。結論應用該細菌重組繫統成功地構建瞭攜帶mFL的重組腺病毒載體,為下一步的基因治療研究奠定瞭基礎。
목적구건휴대소서Flt3배체(murine flt3 ligand,mFL)적중조선병독재체병검측타재감염후적소서간암세포중적표체,위간암기인치료제공실험기출。방법 PCR확증함유mFL적질립,응용고효세균내동원중조계통구건휴대mFL적중조선병독,감염소서간암세포주Hepa1-6,일보법제취세포총RNA,RT-PCR검측mFL적표체。결과구건료휴대mFL적중조선병독,병재감염후적Hepa1-6세포중검측도료mFL적mRNA。결론응용해세균중조계통성공지구건료휴대mFL적중조선병독재체,위하일보적기인치료연구전정료기출。
Objective To construct the recombinant adenovirus vector carrying murine Flt3 ligand (AdmFL) and detect the expression of mFL in Hepa1-6 cells following infection by AdmFL. Methods We amplified mFL from the plasmid and constructed the recombinant adenovirus vector using a new simplified bacterial homologous recombination system, then infected Hepa1-6 cells and detected the expression of mFL by RT-PCR. Results We successfully constructed the recombinant adenovirus vector carrying mFL and detected its expression in infected Hepa1-6 cells. Conclusions The construction of adenovirus vector carrying mFL paves the way for further application in cancer gene therapy.