中华传染病杂志
中華傳染病雜誌
중화전염병잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES
2003年
2期
101-104
,共4页
阮冰%王淑颖%陈勇%庄辉%马亦林%干梦九
阮冰%王淑穎%陳勇%莊輝%馬亦林%榦夢九
원빙%왕숙영%진용%장휘%마역림%간몽구
肝炎病毒,戊型%读码框架%克隆,分子%聚合酶链反应
肝炎病毒,戊型%讀碼框架%剋隆,分子%聚閤酶鏈反應
간염병독,무형%독마광가%극륭,분자%취합매련반응
目的研制戊型肝炎病毒重组抗原诊断试剂.方法用融合蛋白表达载体pGEX-4T-3,表达戊型肝炎病毒第二开放读码框架(ORF2)近3′端492 bp片段.结果经酶切、聚合酶链反应(PCR)及序列分析鉴定,证实重组表达质粒(pGEX-4T-3-HEV)构建成功.重组体菌株经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),在46×103处见一蛋白条带.该蛋白经Western blot分析,能与1:100抗-HEV阳性血清起特异性反应;应用于ELISA诊断,与Genelabs公司重组抗原抗-HEV ELISA试剂盒比较,一致率为96.9%.结论该克隆表达产物可用于制备戊型肝炎重组抗原诊断试剂.
目的研製戊型肝炎病毒重組抗原診斷試劑.方法用融閤蛋白錶達載體pGEX-4T-3,錶達戊型肝炎病毒第二開放讀碼框架(ORF2)近3′耑492 bp片段.結果經酶切、聚閤酶鏈反應(PCR)及序列分析鑒定,證實重組錶達質粒(pGEX-4T-3-HEV)構建成功.重組體菌株經異丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達,通過十二烷基硫痠鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE),在46×103處見一蛋白條帶.該蛋白經Western blot分析,能與1:100抗-HEV暘性血清起特異性反應;應用于ELISA診斷,與Genelabs公司重組抗原抗-HEV ELISA試劑盒比較,一緻率為96.9%.結論該剋隆錶達產物可用于製備戊型肝炎重組抗原診斷試劑.
목적연제무형간염병독중조항원진단시제.방법용융합단백표체재체pGEX-4T-3,표체무형간염병독제이개방독마광가(ORF2)근3′단492 bp편단.결과경매절、취합매련반응(PCR)급서렬분석감정,증실중조표체질립(pGEX-4T-3-HEV)구건성공.중조체균주경이병기-β-D류대반유당감(IPTG)유도표체,통과십이완기류산납취병희선알응효전영(SDS-PAGE),재46×103처견일단백조대.해단백경Western blot분석,능여1:100항-HEV양성혈청기특이성반응;응용우ELISA진단,여Genelabs공사중조항원항-HEV ELISA시제합비교,일치솔위96.9%.결론해극륭표체산물가용우제비무형간염중조항원진단시제.
