集美大学学报:自然科学版
集美大學學報:自然科學版
집미대학학보:자연과학판
Journal of Jimei University(Natural Science)
2011年
5期
340-345
,共6页
潘冰青%刘光明%曹敏杰%蔡秋凤%翁武银%苏文金
潘冰青%劉光明%曹敏傑%蔡鞦鳳%翁武銀%囌文金
반빙청%류광명%조민걸%채추봉%옹무은%소문금
鲤鱼%胶原蛋白%过敏原%稳定性%IgE结合活性
鯉魚%膠原蛋白%過敏原%穩定性%IgE結閤活性
리어%효원단백%과민원%은정성%IgE결합활성
Cyprinus carpio%collagen%allergen%stability%specific IgE reactivity
以鲤鱼鱼皮为研究对象,通过碱溶、酸溶、NaCl盐析等方法从鱼皮中分离纯化得到了胶原蛋白.SDS-PAGE分析显示,鲤鱼胶原蛋白由分子质量约为120 ku和115 ku的2条α链(α1与α2)、分子质量约为250 ku的β链以及大分子质量的γ链组成.分析比较鲤鱼胶原蛋白与鲢鱼小清蛋白的基本性质,结果显示:2种蛋白质的pH值稳定性相似;胶原蛋白的热稳定性不如小清蛋白,但比小清蛋白更耐胃蛋白酶消化;在高温高压处理下,胶原蛋白明显降解,小清蛋白则出现了降解与聚合2种情况.应用8份鱼类过敏患者血清的酶联免疫吸附测定实验结果显示,小清蛋白对6份血清有特异性IgE反应,胶原蛋白对3份血清有特异性IgE反应.Dot-blot实验结果显示,胶原蛋白与鱼类过敏患者血清出现了特异性的杂交显色斑点.与小清蛋白相似,鲤鱼胶原蛋白具有特异的IgE结合活性,提示其是一种潜在的过敏原.
以鯉魚魚皮為研究對象,通過堿溶、痠溶、NaCl鹽析等方法從魚皮中分離純化得到瞭膠原蛋白.SDS-PAGE分析顯示,鯉魚膠原蛋白由分子質量約為120 ku和115 ku的2條α鏈(α1與α2)、分子質量約為250 ku的β鏈以及大分子質量的γ鏈組成.分析比較鯉魚膠原蛋白與鰱魚小清蛋白的基本性質,結果顯示:2種蛋白質的pH值穩定性相似;膠原蛋白的熱穩定性不如小清蛋白,但比小清蛋白更耐胃蛋白酶消化;在高溫高壓處理下,膠原蛋白明顯降解,小清蛋白則齣現瞭降解與聚閤2種情況.應用8份魚類過敏患者血清的酶聯免疫吸附測定實驗結果顯示,小清蛋白對6份血清有特異性IgE反應,膠原蛋白對3份血清有特異性IgE反應.Dot-blot實驗結果顯示,膠原蛋白與魚類過敏患者血清齣現瞭特異性的雜交顯色斑點.與小清蛋白相似,鯉魚膠原蛋白具有特異的IgE結閤活性,提示其是一種潛在的過敏原.
이리어어피위연구대상,통과감용、산용、NaCl염석등방법종어피중분리순화득도료효원단백.SDS-PAGE분석현시,리어효원단백유분자질량약위120 ku화115 ku적2조α련(α1여α2)、분자질량약위250 ku적β련이급대분자질량적γ련조성.분석비교리어효원단백여련어소청단백적기본성질,결과현시:2충단백질적pH치은정성상사;효원단백적열은정성불여소청단백,단비소청단백경내위단백매소화;재고온고압처리하,효원단백명현강해,소청단백칙출현료강해여취합2충정황.응용8빈어류과민환자혈청적매련면역흡부측정실험결과현시,소청단백대6빈혈청유특이성IgE반응,효원단백대3빈혈청유특이성IgE반응.Dot-blot실험결과현시,효원단백여어류과민환자혈청출현료특이성적잡교현색반점.여소청단백상사,리어효원단백구유특이적IgE결합활성,제시기시일충잠재적과민원.
Collagen of carp skin was isolated by alkali extraction,acid extraction and NaCl precipitation.Carp collagen consisted of α1 chain(120 ku),α2 chain(115ku),β chain(250 ku),and small amount of γ chain in SDS-PAGE.Analysis of the basic property of collagen and parvalbumin(the major allergen of fish)showed the pH stability of two proteins did not present distinct difference;collagen was less stable to heating treatment,but more resistive to SGF digestion;treated with high temperature and high pressure,collagen was decomposed into fragments,parvalbumin presented decomposition and polymerization simultaneously.ELISA analysis of eight sera from fish-allergic patients showed parvalbumin had the specific IgE reactivity to six sera,while collagen had the specific IgE reactivity to three sera.Dot-blot analysis of collagen also presented the specific IgE reactivity to the sera from fish-allergic patients.The results indicated that carp collagen might be a potential allergen.