江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
5期
957-963
,共7页
张大勇%许玲%易金鑫%徐照龙%何晓兰%刘晓庆%黄益洪%ZULFIQAR A%马鸿翔
張大勇%許玲%易金鑫%徐照龍%何曉蘭%劉曉慶%黃益洪%ZULFIQAR A%馬鴻翔
장대용%허령%역금흠%서조룡%하효란%류효경%황익홍%ZULFIQAR A%마홍상
大豆%乙烯响应因子(ERF)%表达分析%适时定量-PCR
大豆%乙烯響應因子(ERF)%錶達分析%適時定量-PCR
대두%을희향응인자(ERF)%표체분석%괄시정량-PCR
利用RT-PCR方法从聚乙二醇(PEG)处理的大豆根部组织中克隆了1个大豆乙烯响应因子(ERF)基因,由于其位于大豆基因组第7染色体上,故命名为GmERF7,基因座为Glyma07g02930.序列分析结果表明:该基因含有1个237 bp长的内含子,开放阅读框(ORF)长585 bp,编码194个氨基酸,蛋白质分子量为2.199× 104,理论等电点为7.06;通过氨基酸序列比对发现,该序列与其他物种ERF类蛋白质氨基酸序列有很高的相似性;聚类分析结果表明,GmERF7与苜蓿和蓖麻遗传距离最近,与拟南芥和葡萄遗传距离相对较远;半定量RT-PCR分析结果表明该基因主要在大豆叶和豆荚中表达,而且在外源20％ PEG处理不同时间后,该基因的表达在根部组织和叶片组织都受到不同程度的诱导,暗示该基因可能对提高植物耐旱性具有一定作用;利用洋葱表皮细胞的亚细胞定位分析结果表明,该蛋白质位于细胞核内,当去除N端信号肽之后,该蛋白质分布于细胞膜部位,这表明该蛋白质在植物体内通过充当转录因子的作用来调节下游基因的表达;适时定量-PCR( Real-time PCR)分析结果证实,该基因在外源ABA处理后呈现先下调后上调又下降的趋势,表明该基因受ABA的诱导,可能参与了ABA依赖的植物抗逆信号转导途径.
利用RT-PCR方法從聚乙二醇(PEG)處理的大豆根部組織中剋隆瞭1箇大豆乙烯響應因子(ERF)基因,由于其位于大豆基因組第7染色體上,故命名為GmERF7,基因座為Glyma07g02930.序列分析結果錶明:該基因含有1箇237 bp長的內含子,開放閱讀框(ORF)長585 bp,編碼194箇氨基痠,蛋白質分子量為2.199× 104,理論等電點為7.06;通過氨基痠序列比對髮現,該序列與其他物種ERF類蛋白質氨基痠序列有很高的相似性;聚類分析結果錶明,GmERF7與苜蓿和蓖痳遺傳距離最近,與擬南芥和葡萄遺傳距離相對較遠;半定量RT-PCR分析結果錶明該基因主要在大豆葉和豆莢中錶達,而且在外源20％ PEG處理不同時間後,該基因的錶達在根部組織和葉片組織都受到不同程度的誘導,暗示該基因可能對提高植物耐旱性具有一定作用;利用洋蔥錶皮細胞的亞細胞定位分析結果錶明,該蛋白質位于細胞覈內,噹去除N耑信號肽之後,該蛋白質分佈于細胞膜部位,這錶明該蛋白質在植物體內通過充噹轉錄因子的作用來調節下遊基因的錶達;適時定量-PCR( Real-time PCR)分析結果證實,該基因在外源ABA處理後呈現先下調後上調又下降的趨勢,錶明該基因受ABA的誘導,可能參與瞭ABA依賴的植物抗逆信號轉導途徑.
이용RT-PCR방법종취을이순(PEG)처리적대두근부조직중극륭료1개대두을희향응인자(ERF)기인,유우기위우대두기인조제7염색체상,고명명위GmERF7,기인좌위Glyma07g02930.서렬분석결과표명:해기인함유1개237 bp장적내함자,개방열독광(ORF)장585 bp,편마194개안기산,단백질분자량위2.199× 104,이론등전점위7.06;통과안기산서렬비대발현,해서렬여기타물충ERF류단백질안기산서렬유흔고적상사성;취류분석결과표명,GmERF7여목숙화비마유전거리최근,여의남개화포도유전거리상대교원;반정량RT-PCR분석결과표명해기인주요재대두협화두협중표체,이차재외원20％ PEG처리불동시간후,해기인적표체재근부조직화협편조직도수도불동정도적유도,암시해기인가능대제고식물내한성구유일정작용;이용양총표피세포적아세포정위분석결과표명,해단백질위우세포핵내,당거제N단신호태지후,해단백질분포우세포막부위,저표명해단백질재식물체내통과충당전록인자적작용래조절하유기인적표체;괄시정량-PCR( Real-time PCR)분석결과증실,해기인재외원ABA처리후정현선하조후상조우하강적추세,표명해기인수ABA적유도,가능삼여료ABA의뢰적식물항역신호전도도경.
