中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
3期
95-99
,共5页
朱丹丹%高学军%严云勤%刘晓飞%陆黎敏
硃丹丹%高學軍%嚴雲勤%劉曉飛%陸黎敏
주단단%고학군%엄운근%류효비%륙려민
牛骨骼肌%启动子%成肌细胞%成纤维细胞
牛骨骼肌%啟動子%成肌細胞%成纖維細胞
우골격기%계동자%성기세포%성섬유세포
分别构建含有牛骨骼肌α-肌动蛋白(α-actin)启动子、牛骨骼肌肌球蛋白轻链2(mylpf)启动子及牛肌酸激酶(ckm)启动子的荧光素酶报告基因表达质粒.将3种荧光素酶表达质粒分别与含有海肾荧光素酶的质粒共转染牛成肌细胞和牛成纤维细胞.经双荧光素酶检测得到转染成肌细胞,72 h后,α-actin启动子的表达量显著高于mylpf启动子和ckm启动子,转染成纤维细胞72 h后,这3种启动子的表达量和空载体相近.结果表明,α-actin启动子在成肌细胞中的表达效率高于mylpf启动子和ckm启动子;3种启动子在成纤维细胞中的表达量与空载体相近,证明了这3种启动子的骨骼肌特异性.通过对骨器肌特异性启动子的研究,为外源基因在骨骼肌组织的特异性表达提供了试验依据,为进一步研究转基因肉牛奠定了基础.
分彆構建含有牛骨骼肌α-肌動蛋白(α-actin)啟動子、牛骨骼肌肌毬蛋白輕鏈2(mylpf)啟動子及牛肌痠激酶(ckm)啟動子的熒光素酶報告基因錶達質粒.將3種熒光素酶錶達質粒分彆與含有海腎熒光素酶的質粒共轉染牛成肌細胞和牛成纖維細胞.經雙熒光素酶檢測得到轉染成肌細胞,72 h後,α-actin啟動子的錶達量顯著高于mylpf啟動子和ckm啟動子,轉染成纖維細胞72 h後,這3種啟動子的錶達量和空載體相近.結果錶明,α-actin啟動子在成肌細胞中的錶達效率高于mylpf啟動子和ckm啟動子;3種啟動子在成纖維細胞中的錶達量與空載體相近,證明瞭這3種啟動子的骨骼肌特異性.通過對骨器肌特異性啟動子的研究,為外源基因在骨骼肌組織的特異性錶達提供瞭試驗依據,為進一步研究轉基因肉牛奠定瞭基礎.
분별구건함유우골격기α-기동단백(α-actin)계동자、우골격기기구단백경련2(mylpf)계동자급우기산격매(ckm)계동자적형광소매보고기인표체질립.장3충형광소매표체질립분별여함유해신형광소매적질립공전염우성기세포화우성섬유세포.경쌍형광소매검측득도전염성기세포,72 h후,α-actin계동자적표체량현저고우mylpf계동자화ckm계동자,전염성섬유세포72 h후,저3충계동자적표체량화공재체상근.결과표명,α-actin계동자재성기세포중적표체효솔고우mylpf계동자화ckm계동자;3충계동자재성섬유세포중적표체량여공재체상근,증명료저3충계동자적골격기특이성.통과대골기기특이성계동자적연구,위외원기인재골격기조직적특이성표체제공료시험의거,위진일보연구전기인육우전정료기출.
