CAJ | 학술논문

目的研究缺氧、高氧对肝星形细胞基质金属蛋白酶Ⅱ(MMP-2)表达及其活性影响.方法分离大鼠肝星形细胞,在缺氧或高氧条件下培养,以免疫细胞化学标记链霉素卵白素生物素(LSAB)法及酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测细胞内MMP-2、基质金属蛋白酶组织抑制因子Ⅱ(TIMP-2)、膜型基质金属蛋白酶Ⅰ(MT1-MMP)的表达,和培养上清中MMP-2、TIMP-2的相对含量,并以酶谱法测培养上清MMP-2活力.结果 (1)缺氧培养12 h,MMP-2表达增高(缺氧组阳性指数:5.7±2.0; 对照组: 3.2±1.0, ; P<0.01),TIMP-2表达则降低(缺氧组阳性指数:2.5±0.7; 对照组: 3.6±1.0; P<0.05);培养上清中MMP-2酶活性明显降低(缺氧组总吸光度值:7.334±1.922; 对照组: 17.277±7.424; P<0.01).缺氧不同时段(6 、12 、24 h)比较,变化以6 h段最明显.(2)高氧培养12 h,上清中MMP-2、TIMP-2蛋白相对含量均高于对照组,TIMP-2更明显(高氧组A450:0.050±0.014; 对照组:0.022±0.010; P<0.01),酶活性亦高于对照组(高氧组总吸光度值:5.252±0.771; 对照组: 4.304±1.083; P<0.05),高氧组MT1-MMP表达增强.结论肝星形细胞对氧敏感.缺氧使肝星形细胞 MMP-2表达增加,该影响在早期较明显;高氧主要使酶活性增强.
목적연구결양、고양대간성형세포기질금속단백매Ⅱ(MMP-2)표체급기활성영향.방법분리대서간성형세포,재결양혹고양조건하배양,이면역세포화학표기련매소란백소생물소(LSAB)법급매련면역흡부(ELISA)법분별검측세포내MMP-2、기질금속단백매조직억제인자Ⅱ(TIMP-2)、막형기질금속단백매Ⅰ(MT1-MMP)적표체,화배양상청중MMP-2、TIMP-2적상대함량,병이매보법측배양상청MMP-2활력.결과 (1)결양배양12 h,MMP-2표체증고(결양조양성지수:5.7±2.0; 대조조: 3.2±1.0, ; P<0.01),TIMP-2표체칙강저(결양조양성지수:2.5±0.7; 대조조: 3.6±1.0; P<0.05);배양상청중MMP-2매활성명현강저(결양조총흡광도치:7.334±1.922; 대조조: 17.277±7.424; P<0.01).결양불동시단(6 、12 、24 h)비교,변화이6 h단최명현.(2)고양배양12 h,상청중MMP-2、TIMP-2단백상대함량균고우대조조,TIMP-2경명현(고양조A450:0.050±0.014; 대조조:0.022±0.010; P<0.01),매활성역고우대조조(고양조총흡광도치:5.252±0.771; 대조조: 4.304±1.083; P<0.05),고양조MT1-MMP표체증강.결론간성형세포대양민감.결양사간성형세포 MMP-2표체증가,해영향재조기교명현;고양주요사매활성증강.