世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2010年
1期
28-32
,共5页
胰星状细胞%培养%鉴定%植块法
胰星狀細胞%培養%鑒定%植塊法
이성상세포%배양%감정%식괴법
目的:建立简单易行的小鼠胰星状细胞(PSCs)原代培养方法,为胰腺纤维化研究提供可靠的体外细胞模型.方法:采用植块法结合酶消化法进行培养,即在无菌条件下取小鼠正常胰腺组织,经过剪碎、胰蛋白酶消化后植入培养瓶中贴壁培养,并予限制性条件培养基进行纯化,通过倒置生物显微镜对传代前后所培养细胞进行形态学、自发荧光及油红染色脂滴的观察,并结合细胞免疫化学和免疫荧光等方法来鉴定小鼠PSCs.结果:小鼠原代PSCs培养3-4 d后油红染色阳性,并能观察到自发荧光现象;传代后的细胞形态主要表现为体积较大,伪足发达,呈"星芒状"或"乌贼样";细胞免疫荧光染色和细胞免疫化学染色显示α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达阳性.结论:植块与酶消化结合法分离小鼠胰腺星状细胞,简单实用、成功率高,能够满足体外实验的要求.
目的:建立簡單易行的小鼠胰星狀細胞(PSCs)原代培養方法,為胰腺纖維化研究提供可靠的體外細胞模型.方法:採用植塊法結閤酶消化法進行培養,即在無菌條件下取小鼠正常胰腺組織,經過剪碎、胰蛋白酶消化後植入培養瓶中貼壁培養,併予限製性條件培養基進行純化,通過倒置生物顯微鏡對傳代前後所培養細胞進行形態學、自髮熒光及油紅染色脂滴的觀察,併結閤細胞免疫化學和免疫熒光等方法來鑒定小鼠PSCs.結果:小鼠原代PSCs培養3-4 d後油紅染色暘性,併能觀察到自髮熒光現象;傳代後的細胞形態主要錶現為體積較大,偽足髮達,呈"星芒狀"或"烏賊樣";細胞免疫熒光染色和細胞免疫化學染色顯示α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)錶達暘性.結論:植塊與酶消化結閤法分離小鼠胰腺星狀細胞,簡單實用、成功率高,能夠滿足體外實驗的要求.
목적:건립간단역행적소서이성상세포(PSCs)원대배양방법,위이선섬유화연구제공가고적체외세포모형.방법:채용식괴법결합매소화법진행배양,즉재무균조건하취소서정상이선조직,경과전쇄、이단백매소화후식입배양병중첩벽배양,병여한제성조건배양기진행순화,통과도치생물현미경대전대전후소배양세포진행형태학、자발형광급유홍염색지적적관찰,병결합세포면역화학화면역형광등방법래감정소서PSCs.결과:소서원대PSCs배양3-4 d후유홍염색양성,병능관찰도자발형광현상;전대후적세포형태주요표현위체적교대,위족발체,정"성망상"혹"오적양";세포면역형광염색화세포면역화학염색현시α-평활기기동단백(α-SMA)표체양성.결론:식괴여매소화결합법분리소서이선성상세포,간단실용、성공솔고,능구만족체외실험적요구.
